24小时热门版块排行榜

返回列表

legend@xx

铁虫 (小有名气)

应助: 1 (幼儿园)
金币: 18.8
帖子: 52
在线: 32.9小时
虫号: 1893109
注册: 2012-07-14
性别: MM
专业: 环境工程

[求助] 水体总DNA，感觉各种不对的情况下跑出来的胶，囧，但是Marker都这样，求教已有3人参与

新手上路，大家轻拍哈~~

对象：河水中微生物的总DNA；
方法：CTAB/蛋白酶
电泳条件：1%的胶；
               M：3微升marker+1微升 SYBR Green I；
               样品：3微升样品+1微升 SYBR Green I+1微升 loadingbuffer；
               70V 30min，跑完发现样没动，又用100V 30min又跑了一次。

现在想问：
1.  为什么marker都拖尾这么严重？完全一坨啊。。
2.  第五个样品那一格没有亮光是不是说明DNA没有提取出来啊？顺便问一下，如果是染色剂直接点样的话会亮吗，不太明白？
3.  1、2、3和4、5、6其实是三个样品分别用两种方法做出来的，除了第4个没提出来，5、6很亮，是否可以说第二种方法更适合我的样品呢？

回复此楼

» 猜你喜欢

为什么蛋白质氨基酸测定大家都测17种? 已经有5人回复
《灰分记：我与坩埚的“灰烬”之恋》已经有3人回复
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费? 已经有256人回复
求助食品检验工（基础知识），中国劳动社会出版社电子版已经有5人回复
胶体几丁质的结晶度？已经有0人回复
诚挚招收全日制博士！！！中国农业科学院麻类研究所谭志坚研究员课题组招收博士已经有2人回复
三甲基羟乙基丙二胺的合成路线已经有5人回复

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

【求助/交流】PCR产物电泳检测已经有20人回复

GOGOGO

1楼2014-02-26 10:51:22

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

ifyousee

新虫 (小有名气)

应助: 34 (小学生)
金币: 145
红花: 1
帖子: 62
在线: 23.1小时
虫号: 999042
注册: 2010-04-17
专业: 细胞增殖、生长与分化

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-02-26 21:00:32

弱弱的好奇一下，你们的marker是新的还是比较久远的？marker放久了也是会降解的
此外你们用的核酸染料是什么啊？
拍照片的时候可以把曝光时间或是光强度什么的调大一些，让图片亮一些。

赞一下

回复此楼

2楼2014-02-26 11:23:43

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

legend@xx

铁虫 (小有名气)

应助: 1 (幼儿园)
金币: 18.8
帖子: 52
在线: 32.9小时
虫号: 1893109
注册: 2012-07-14
性别: MM
专业: 环境工程

引用回帖:

2楼: Originally posted by ifyousee at 2014-02-26 11:23:43
弱弱的好奇一下，你们的marker是新的还是比较久远的？marker放久了也是会降解的
此外你们用的核酸染料是什么啊？
拍照片的时候可以把曝光时间或是光强度什么的调大一些，让图片亮一些。

marker是刚买的应该没问题 15000bp的
核酸染料是SYBR Green I
谢谢~~