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莫馨

新虫 (初入文坛)

[求助] 请大侠帮我看看这个荧光定量的结果能用吗?麻烦请指点一哈,先谢谢了。 已有2人参与

1-5为目的基因,6-10为管家基因
请大侠帮我看看这个荧光定量的结果能用吗?麻烦请指点一哈,先谢谢了。
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莫馨

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by atlanticwi at 2014-02-24 20:18:00
....
  从最后一张图没看清那些是Target,哪些是Internal Control,直观感觉有以下问题
  1. 你木有做技术三重复,或是部分做了,部分没做
  2. 有几个Ct值过低,14、17的那几个作为内参或Target都是不合适的,C ...

14和17的是我的内参,我在导数据时把个别偏差远的数据去除了,整个都是做了三重复的。
3楼2014-02-24 20:35:29
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查看全部 8 个回答

atlanticwi

金虫 (正式写手)

琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气

★ ★ ★
gyesang: 金币+3, 鼓励回帖交流! 2014-02-24 21:13:02
....
  从最后一张图没看清那些是Target,哪些是Internal Control,直观感觉有以下问题
  1. 你木有做技术三重复,或是部分做了,部分没做
  2. 有几个Ct值过低,14、17的那几个作为内参或Target都是不合适的,Ct值也要有范围的,20到35前都可以,如果你这个是Target,需要做稀释样品,或稍加cDNA,如果你这个是内参,就需要换一个低表达量内参。
  3. Meltcurve中有几个有多余峰。有几个干脆就是引物二聚体
Let God do with it as He wills
2楼2014-02-24 20:18:00
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lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你最好把每个样品是哪个都标记一下,哪些是对应的内参。只看这些数据只能表明你的荧光定量Ct值。
hehe
4楼2014-02-24 20:54:28
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
没有标准品,凑合着用吧。不知道ΔΔCt方法是否需要标准品,但是可以直接比较Ct值。
5楼2014-02-25 10:32:00
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