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请大侠帮我看看这个荧光定量的结果能用吗?麻烦请指点一哈,先谢谢了。
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莫馨
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请大侠帮我看看这个荧光定量的结果能用吗?麻烦请指点一哈,先谢谢了。
已有2人参与
1-5为目的基因,6-10为管家基因
2815_JCLIVI$AT{@ZR27A2I.jpg
C%683UET@SPCCFHVYKNKTYQ.jpg
UV[@]N@GYXQH@G{%RABIX)C.jpg
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凌波丽
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1楼
2014-02-24 19:58:04
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atlanticwi
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2014-02-24 21:13:02
....
从最后一张图没看清那些是Target,哪些是Internal Control,直观感觉有以下问题
1. 你木有做技术三重复,或是部分做了,部分没做
2. 有几个Ct值过低,14、17的那几个作为内参或Target都是不合适的,Ct值也要有范围的,20到35前都可以,如果你这个是Target,需要做稀释样品,或稍加cDNA,如果你这个是内参,就需要换一个低表达量内参。
3. Meltcurve中有几个有多余峰。有几个干脆就是引物二聚体
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Let God do with it as He wills
2楼
2014-02-24 20:18:00
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莫馨
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专业: 植物学研究的新技术、新方
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2楼
:
Originally posted by
atlanticwi
at 2014-02-24 20:18:00
....
从最后一张图没看清那些是Target,哪些是Internal Control,直观感觉有以下问题
1. 你木有做技术三重复,或是部分做了,部分没做
2. 有几个Ct值过低,14、17的那几个作为内参或Target都是不合适的,C ...
14和17的是我的内参,我在导数据时把个别偏差远的数据去除了,整个都是做了三重复的。
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3楼
2014-02-24 20:35:29
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lvbobo823
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感谢参与,应助指数 +1
你最好把每个样品是哪个都标记一下,哪些是对应的内参。只看这些数据只能表明你的荧光定量Ct值。
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hehe
4楼
2014-02-24 20:54:28
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jurkat.1640
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【答案】应助回帖
感谢参与,应助指数 +1
没有标准品,凑合着用吧。不知道ΔΔCt方法是否需要标准品,但是可以直接比较Ct值。
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5楼
2014-02-25 10:32:00
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莫馨
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4楼
:
Originally posted by
lvbobo823
at 2014-02-24 20:54:28
你最好把每个样品是哪个都标记一下,哪些是对应的内参。只看这些数据只能表明你的荧光定量Ct值。
在最后一个图里,Rep组中 1,2,3,4,5都是目的基因;5,6,7,8,9,10都是管家基因,采用2ΔΔCt法计算,这些数据可以用吗?
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6楼
2014-02-26 22:28:07
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莫馨
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jurkat.1640
at 2014-02-25 10:32:00
没有标准品,凑合着用吧。不知道ΔΔCt方法是否需要标准品,但是可以直接比较Ct值。
我用的是2ΔΔCt方法,这个好像不需要用标准品,这点不太确定。
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7楼
2014-02-26 22:30:20
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莫馨
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5楼
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Originally posted by
jurkat.1640
at 2014-02-25 10:32:00
没有标准品,凑合着用吧。不知道ΔΔCt方法是否需要标准品,但是可以直接比较Ct值。
这份数据可以吗?
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8楼
2014-02-26 22:33:07
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