应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » EcoRI和BglII这一对内切酶效率如何
71/1返回列表
查看: 2007  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

tiankong很蓝

银虫 (小有名气)

[求助] EcoRI和BglII这一对内切酶效率如何 已有2人参与

求助：1，BglII内切酶酶切效率如何
           2，EcoRI和BglII这一对内切酶效率如何
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
深呼吸，嘴角上扬，告诉自己：我很好！！！
1楼 2014-02-24 17:48:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zh10246

铁杆木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流经验！ 2014-02-24 21:13:49
都是不错的酶，用过多次，没遇到问题
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2014-02-24 18:24:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

atlanticwi

金虫 (正式写手)

琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-02-24 21:13:56
tiankong很蓝: 金币+10, ★★★很有帮助 2014-02-25 09:37:35
...
    首先得看公司了，不同公司有些酶的活性、Buffer都不一样。
    EcoRI没得说，那个公司的都很好使，就是注意不要出现Star activity就行，这个酶还是比较容易造成这个结果的。
    以NEB公司来看，EcoRI和BglII主要是不同的Buffer造成的不兼容，用NEB3.1 Buffer使BglII的活性最大，但降低EcoRI活性50%会比较合适。
    其他公司的不太清楚，如果觉得不可以的话，分步单酶切都是可行的
    祝实验顺利
赞一下(1人) 回复此楼
Let God do with it as He wills
3楼2014-02-24 18:26:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tiankong很蓝

银虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by atlanticwi at 2014-02-24 18:26:47
...
    首先得看公司了，不同公司有些酶的活性、Buffer都不一样。
    EcoRI没得说，那个公司的都很好使，就是注意不要出现Star activity就行，这个酶还是比较容易造成这个结果的。
    以NEB公司来看，EcoRI和 ...

请问您一下，在酶切过程中我要如何才能避免EcoRI的Star活性呢？谢谢
赞一下 回复此楼
深呼吸，嘴角上扬，告诉自己：我很好！！！
4楼2014-02-24 19:18:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tiankong很蓝

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zh10246 at 2014-02-24 18:24:38
都是不错的酶，用过多次，没遇到问题

好的，谢谢
回复此楼
深呼吸，嘴角上扬，告诉自己：我很好！！！
5楼2014-02-24 19:24:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

atlanticwi

金虫 (正式写手)

琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气
★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-02-24 21:14:07
引用回帖:
4楼: Originally posted by tiankong很蓝 at 2014-02-24 19:18:51
请问您一下，在酶切过程中我要如何才能避免EcoRI的Star活性呢？谢谢...

1. 用正确的Buffer，不正确的Buffer会有不正确的离子强度
2. 酶切时间不要过长，请遵照说明书，Thermo的FD酶一般要求30min，而NEB好像不要超过3 hr吧
3. 酶用量不要超过总体积10%，也就是指甘油含量不要超过5%
其他就没什么了
赞一下 回复此楼
Let God do with it as He wills
6楼2014-02-24 19:29:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yugari_nagi

铁虫 (初入文坛)
避免星星活性就买NEB的HF酶咯 EcoRI是有HF版本的
赞一下 回复此楼
7楼2014-02-27 16:54:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 tiankong很蓝 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 如果此刻你正在为国基感到焦虑，不妨来听听这首《基金之外》 +3 scalable 2026-08-24 3/150 2026-08-24 15:02 by arzu_hma
[基金申请] 今日不放榜？网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +17 医学老男孩 2026-08-20 21/1050 2026-08-24 14:21 by refreshing11
[基金申请] 能否退出参与的面上项目解除限项 +15 koalala 2026-08-24 17/850 2026-08-24 14:16 by hhs666
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +17 羊腰板 2026-08-21 18/900 2026-08-24 12:03 by iaeyuan
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +12 kulium 2026-08-21 15/750 2026-08-24 12:02 by iaeyuan
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +6 炎黄贵胄 2026-08-22 7/350 2026-08-24 11:58 by 6543yes
[基金申请] 朋友圈看到的 +7 wangzilk 2026-08-18 9/450 2026-08-24 10:50 by cmrandy
[基金申请] 让我中一个面上吧！ +13 大萍1987 2026-08-20 16/800 2026-08-24 10:23 by 太傻了
[基金申请] 明天应该可查了！？ +4 chengyan1220 2026-08-23 4/200 2026-08-24 08:47 by gloomy6159
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +4 process2012 2026-08-23 5/250 2026-08-23 19:58 by jurkat.1640
[基金申请] 今天放榜吗？ +15 布布和一二 2026-08-19 16/800 2026-08-23 09:55 by 张春生
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +7 且听虎啸 2026-08-17 8/400 2026-08-22 21:55 by 医学老男孩
[基金申请] 人气不行了 +8 fansofjerry 2026-08-21 8/400 2026-08-22 16:30 by zyqchem
[基金申请] 今天基金会出结果吗？20260819 +16 kkkl_v 2026-08-19 17/850 2026-08-22 16:12 by 阿布Abu
[基金申请] 时间戳今天，20号变了 +5 archvillain 2026-08-20 5/250 2026-08-22 06:12 by hui_daxiao
[基金申请] 看来今天不会放榜了？ +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧？ +4 哈哈蛤？ 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[论文投稿] 投稿咨询 +5 wwm09 2026-08-17 7/350 2026-08-21 10:11 by 期刊论文帮手
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭