应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » EcoRI和BglII这一对内切酶效率如何
71/1返回列表
查看: 2048  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

tiankong很蓝

银虫 (小有名气)

[求助] EcoRI和BglII这一对内切酶效率如何 已有2人参与

求助：1，BglII内切酶酶切效率如何
           2，EcoRI和BglII这一对内切酶效率如何
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
深呼吸，嘴角上扬，告诉自己：我很好！！！
1楼 2014-02-24 17:48:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zh10246

铁杆木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流经验！ 2014-02-24 21:13:49
都是不错的酶，用过多次，没遇到问题
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2014-02-24 18:24:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

atlanticwi

金虫 (正式写手)

琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-02-24 21:13:56
tiankong很蓝: 金币+10, ★★★很有帮助 2014-02-25 09:37:35
...
    首先得看公司了，不同公司有些酶的活性、Buffer都不一样。
    EcoRI没得说，那个公司的都很好使，就是注意不要出现Star activity就行，这个酶还是比较容易造成这个结果的。
    以NEB公司来看，EcoRI和BglII主要是不同的Buffer造成的不兼容，用NEB3.1 Buffer使BglII的活性最大，但降低EcoRI活性50%会比较合适。
    其他公司的不太清楚，如果觉得不可以的话，分步单酶切都是可行的
    祝实验顺利
赞一下(1人) 回复此楼
Let God do with it as He wills
3楼2014-02-24 18:26:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tiankong很蓝

银虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by atlanticwi at 2014-02-24 18:26:47
...
    首先得看公司了，不同公司有些酶的活性、Buffer都不一样。
    EcoRI没得说，那个公司的都很好使，就是注意不要出现Star activity就行，这个酶还是比较容易造成这个结果的。
    以NEB公司来看，EcoRI和 ...

请问您一下，在酶切过程中我要如何才能避免EcoRI的Star活性呢？谢谢
赞一下 回复此楼
深呼吸，嘴角上扬，告诉自己：我很好！！！
4楼2014-02-24 19:18:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tiankong很蓝

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zh10246 at 2014-02-24 18:24:38
都是不错的酶，用过多次，没遇到问题

好的，谢谢
回复此楼
深呼吸，嘴角上扬，告诉自己：我很好！！！
5楼2014-02-24 19:24:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

atlanticwi

金虫 (正式写手)

琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气
★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-02-24 21:14:07
引用回帖:
4楼: Originally posted by tiankong很蓝 at 2014-02-24 19:18:51
请问您一下，在酶切过程中我要如何才能避免EcoRI的Star活性呢？谢谢...

1. 用正确的Buffer，不正确的Buffer会有不正确的离子强度
2. 酶切时间不要过长，请遵照说明书，Thermo的FD酶一般要求30min，而NEB好像不要超过3 hr吧
3. 酶用量不要超过总体积10%，也就是指甘油含量不要超过5%
其他就没什么了
赞一下 回复此楼
Let God do with it as He wills
6楼2014-02-24 19:29:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yugari_nagi

铁虫 (初入文坛)
避免星星活性就买NEB的HF酶咯 EcoRI是有HF版本的
赞一下 回复此楼
7楼2014-02-27 16:54:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 tiankong很蓝 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 投票:  有多少人是今天查系统知道结果的？ +17 爱看书的可乐 2026-08-26 19/950 2026-08-31 11:51 by xiangy672
[基金申请] 面上意见出来了 +10 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 19/950 2026-08-31 08:01 by blueearth171
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已，这评审意见是按照杰青的条件评的吧？ +6 gouxfjh 2026-08-28 11/550 2026-08-30 07:57 by gouxfjh
[基金申请] 国自然评审意见 +13 wangmingqi 2026-08-28 19/950 2026-08-29 10:22 by Poppy1104
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +4 bud_bud 2026-08-27 7/350 2026-08-29 07:23 by foolishmani
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高，自己申请怎么就这么难 +12 Kittylucky 2026-08-27 13/650 2026-08-29 00:04 by superceng
[基金申请] 系统查不到 +11 董八千 2026-08-26 11/550 2026-08-28 18:06 by Leogzhya
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 9/450 2026-08-28 11:06 by maolC
[基金申请] 怎么查啊 +6 huang1991js 2026-08-26 6/300 2026-08-28 08:42 by winsaint
[基金申请] 哪位高人中了，把查询到的截图贴出来让我看看，让我长长见识 +5 yuleib84 2026-08-26 6/300 2026-08-28 00:02 by yudaoqian88
[基金申请] 面上合作单位盖章 +5 ssyjh 2026-08-27 5/250 2026-08-27 20:50 by gdfollow
[基金申请] 基金未中，这种答复是模板吗？ +5 zhaosm1982 2026-08-27 6/300 2026-08-27 16:00 by lfy8008
[基金申请] 看板上这么多中的，有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉…… +5 a089 2026-08-26 6/300 2026-08-27 14:05 by jonewore
[基金申请] 2026年8月25日国自然放榜前突然收到列入评审专家邮件，有关系吗？ +25 木水思豆 2026-08-25 28/1400 2026-08-26 14:53 by draco1987
[基金申请] 出来了 +9 trojank 2026-08-26 9/450 2026-08-26 14:25 by 宝贝虫子
[基金申请] 国合里面能看到了 +7 一怀馨秋 2026-08-26 7/350 2026-08-26 11:23 by zhaosm1982
[基金申请] 国际合作可查了，中了面上 (EPI+1)(金币+50) +18 Ldrop2023 2026-08-26 18/900 2026-08-26 11:15 by cmrandy
[基金申请] 国合可查了 +3 paperzjh 2026-08-26 3/150 2026-08-26 10:41 by LemmonTr
[基金申请] 牛来！米来！面来！ +8 beefly 2026-08-26 8/400 2026-08-26 08:37 by xuzhipiao
[基金申请] 没有任何消息-是不是就凉了 +9 图啦图啦 2026-08-24 10/500 2026-08-25 11:59 by 南海小哥
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭