应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » EcoRI和BglII这一对内切酶效率如何
71/1返回列表
查看: 1865  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

tiankong很蓝

银虫 (小有名气)

[求助] EcoRI和BglII这一对内切酶效率如何 已有2人参与

求助：1，BglII内切酶酶切效率如何
           2，EcoRI和BglII这一对内切酶效率如何
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
深呼吸，嘴角上扬，告诉自己：我很好！！！
1楼 2014-02-24 17:48:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zh10246

铁杆木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流经验！ 2014-02-24 21:13:49
都是不错的酶，用过多次，没遇到问题
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2014-02-24 18:24:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

atlanticwi

金虫 (正式写手)

琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-02-24 21:13:56
tiankong很蓝: 金币+10, ★★★很有帮助 2014-02-25 09:37:35
...
    首先得看公司了，不同公司有些酶的活性、Buffer都不一样。
    EcoRI没得说，那个公司的都很好使，就是注意不要出现Star activity就行，这个酶还是比较容易造成这个结果的。
    以NEB公司来看，EcoRI和BglII主要是不同的Buffer造成的不兼容，用NEB3.1 Buffer使BglII的活性最大，但降低EcoRI活性50%会比较合适。
    其他公司的不太清楚，如果觉得不可以的话，分步单酶切都是可行的
    祝实验顺利
赞一下(1人) 回复此楼
Let God do with it as He wills
3楼2014-02-24 18:26:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tiankong很蓝

银虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by atlanticwi at 2014-02-24 18:26:47
...
    首先得看公司了，不同公司有些酶的活性、Buffer都不一样。
    EcoRI没得说，那个公司的都很好使，就是注意不要出现Star activity就行，这个酶还是比较容易造成这个结果的。
    以NEB公司来看，EcoRI和 ...

请问您一下，在酶切过程中我要如何才能避免EcoRI的Star活性呢？谢谢
赞一下 回复此楼
深呼吸，嘴角上扬，告诉自己：我很好！！！
4楼2014-02-24 19:18:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tiankong很蓝

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zh10246 at 2014-02-24 18:24:38
都是不错的酶，用过多次，没遇到问题

好的，谢谢
回复此楼
深呼吸，嘴角上扬，告诉自己：我很好！！！
5楼2014-02-24 19:24:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

atlanticwi

金虫 (正式写手)

琴美喜欢发呆 不喜欢发脾气
★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-02-24 21:14:07
引用回帖:
4楼: Originally posted by tiankong很蓝 at 2014-02-24 19:18:51
请问您一下，在酶切过程中我要如何才能避免EcoRI的Star活性呢？谢谢...

1. 用正确的Buffer，不正确的Buffer会有不正确的离子强度
2. 酶切时间不要过长，请遵照说明书，Thermo的FD酶一般要求30min，而NEB好像不要超过3 hr吧
3. 酶用量不要超过总体积10%，也就是指甘油含量不要超过5%
其他就没什么了
赞一下 回复此楼
Let God do with it as He wills
6楼2014-02-24 19:29:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yugari_nagi

铁虫 (初入文坛)
避免星星活性就买NEB的HF酶咯 EcoRI是有HF版本的
赞一下 回复此楼
7楼2014-02-27 16:54:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 tiankong很蓝 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 288求调剂 +15 于海海海海 2026-03-19 15/750 2026-03-19 22:41 by 学员8dgXkO
[考研] 085700资源与环境308求调剂 +5 墨墨漠 2026-03-18 5/250 2026-03-19 22:40 by 学员8dgXkO
[考博] 申博26年 +3 八6八68 2026-03-19 3/150 2026-03-19 19:43 by nxgogo
[考研] 271材料工程求调剂 +6 .6lL 2026-03-18 6/300 2026-03-19 15:41 by haoshis
[考研] 一志愿天津大学化学工艺专业（081702）315分求调剂 +11 yangfz 2026-03-17 11/550 2026-03-19 15:06 by houyaoxu
[考研] 材料考研调剂 +3 xwt。 2026-03-19 3/150 2026-03-19 11:22 by w沐阳w
[考研] 材料080500调剂求收留 +4 一颗meteor 2026-03-13 4/200 2026-03-19 10:32 by 30660438
[考研] 274求调剂 +6 S.H1 2026-03-18 6/300 2026-03-19 09:34 by 花店相见
[考研] 0703化学 305求调剂 +4 FY_yy 2026-03-14 4/200 2026-03-19 05:54 by anny19840123
[考研] 化学工程321分求调剂 +15 大米饭！ 2026-03-15 18/900 2026-03-18 14:52 by haxia
[考研] 0854，计算机类招收调剂 +3 胡辣汤放糖 2026-03-15 6/300 2026-03-18 12:09 by 上岸上岸……..
[考研] 280求调剂 +6 咕噜晓晓 2026-03-18 7/350 2026-03-18 11:25 by 无际的草原
[考研] 268求调剂 +6 简单点0 2026-03-17 6/300 2026-03-18 09:04 by 无际的草原
[考博] 26博士申请 +3 1042136743 2026-03-17 3/150 2026-03-17 23:30 by 轻松不少随
[考研] 308求调剂 +4 是Lupa啊 2026-03-16 4/200 2026-03-17 17:12 by ruiyingmiao
[基金申请] 今年的国基金是打分制吗？ 50+3 zhanghaozhu 2026-03-14 3/150 2026-03-16 17:07 by 北京莱茵润色
[考研] 一志愿211 0703方向310分求调剂 +3 努力奋斗112 2026-03-15 3/150 2026-03-16 16:44 by houyaoxu
[考研] 277材料科学与工程080500求调剂 +3 自由煎饼果子 2026-03-16 3/150 2026-03-16 14:10 by 运气yunqi
[考研] 22408总分284求调剂 +3 InAspic 2026-03-13 3/150 2026-03-15 11:10 by zhq0425
[考研] 0856材料与化工301求调剂 +5 奕束光 2026-03-13 5/250 2026-03-13 22:00 by 星空星月
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭