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拖尾因子达不到要求 已有3人参与
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我在建立测定核酸的色谱条件，结果拖尾因子只有0.5左右，我尝试了加三乙胺，调节流动相比例，最终还换了柱子，结果如下： 我要继续哪方面的调试呢？ |
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2014-02-24 14:23:24, 29.5 K
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5楼2014-03-03 10:18:18
wuhaibobo
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【答案】应助回帖
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516tt: 金币+20, ★有帮助, 谢谢 2014-03-03 10:17:01
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516tt: 金币+20, ★有帮助, 谢谢 2014-03-03 10:17:01
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个人建议考虑以下三方面： 1.加入磷酸盐且调节PH值，加三乙胺和酸都应该都不好使的，磷酸盐体系能够加强保留，加的量保证磷酸盐在10~30mM； 2. 调节PH在2.5~7.6之间，因为核酸有等电点，等电点下一定可以得到比较单一的峰； 3.洗脱时如果有机相是甲醇，可以换成乙腈， 4.样品应该考虑用酸溶解以增加溶解性； 5.开始摸方法的时候尽量使供试品的浓度比较低，这样容易发现什么色谱条件最敏感，另外考虑一下样品的稳定性，试验过程中看峰纯度可以知道样品的纯度如何，峰的纯度如何。 |
4楼2014-02-25 13:24:06
