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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » [求助]细胞培养时有许多呈圆形
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w7363387

铜虫 (初入文坛)

[求助] [求助]细胞培养时有许多呈圆形已有3人参与

本人是细胞培养的新手，在培养鼠成纤维细胞时发现许多细胞并没有呈梭型，而是呈圆形存在且未悬浮。求教高手我该如何处理啊。
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1楼2014-02-24 12:39:08
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
w7363387: 金币+1, ★有帮助 2014-02-25 11:09:55
刚接种细胞前几个小时只有部分舒展开；细胞分裂时是圆形而且不悬浮。
如果是培养不好的话，细胞会悬浮。
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5楼2014-02-25 10:39:19
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yipan

铜虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
wizardfan: 金币+3, 谢谢参与 2014-02-25 08:18:25
成纤维细胞的原代培养可用酶消化法或组织块法，其中组织块法又因其操作简便、条件易于控制而应用更为普遍。通常，以酶消化法获得的成纤维细胞悬液在接种后5～10min即可见细胞以伪足初期附着，与底物形成一些接触点；然后细胞逐渐呈放射状伸展，胞体的中心部分亦随之变扁平；最快者大约在接种后30min，细胞贴附底物即较为完全，呈现成纤维细胞的形态。采用组织块法则大约在接种后2～3天到1周左右，在接种的皮肤组织块周围长出细胞。待细胞融合成片，铺满培养容器底壁大部分时即可进行传代。一般都采用胰蛋白酶(trypsin)，将成纤维细胞从底壁消化下来后分瓶作传代培养。成纤维细胞在体外培养条件下能保持良好的分裂增殖能力。细胞分裂时变为球形；分裂后又平铺在附着物的表面成为有突起的扁平细胞。体外培养的成纤维细胞，其生命期限与物种等因素有关。
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2楼2014-02-24 14:15:07
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w7363387

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by yipan at 2014-02-24 14:15:07
成纤维细胞的原代培养可用酶消化法或组织块法，其中组织块法又因其操作简便、条件易于控制而应用更为普遍。通常，以酶消化法获得的成纤维细胞悬液在接种后5～10min即可见细胞以伪足初期附着，与底物形成一些接触点； ...

那你认为我在培养时圆形细胞占50%左右是正常情况吗？
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3楼2014-02-25 07:59:18
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yipan

铜虫 (职业作家)
引用回帖:
3楼: Originally posted by w7363387 at 2014-02-25 07:59:18
那你认为我在培养时圆形细胞占50%左右是正常情况吗？...

百分之五十可以转瓶了。
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4楼2014-02-25 09:09:21
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