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[求助]细胞培养时有许多呈圆形 已有3人参与
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| 本人是细胞培养的新手，在培养鼠成纤维细胞时发现许多细胞并没有呈梭型，而是呈圆形存在且未悬浮。求教高手我该如何处理啊。 |
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yipan 
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【答案】应助回帖
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wizardfan: 金币+3, 谢谢参与 2014-02-25 08:18:25
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| 成纤维细胞的原代培养可用酶消化法或组织块法，其中组织块法又因其操作简便、条件易于控制而应用更为普遍。通常，以酶消化法获得的成纤维细胞悬液在接种后5～10min即可见细胞以伪足初期附着，与底物形成一些接触点；然后细胞逐渐呈放射状伸展，胞体的中心部分亦随之变扁平；最快者大约在接种后30min，细胞贴附底物即较为完全，呈现成纤维细胞的形态。采用组织块法则大约在接种后2～3天到1周左右，在接种的皮肤组织块周围长出细胞。待细胞融合成片，铺满培养容器底壁大部分时即可进行传代。一般都采用胰蛋白酶(trypsin)，将成纤维细胞从底壁消化下来后分瓶作传代培养。成纤维细胞在体外培养条件下能保持良好的分裂增殖能力。细胞分裂时变为球形；分裂后又平铺在附着物的表面成为有突起的扁平细胞。体外培养的成纤维细胞，其生命期限与物种等因素有关。 |
2楼2014-02-24 14:15:07
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yipan
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