24小时热门版块排行榜    

查看: 4959  |  回复: 12
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

widersky

新虫 (小有名气)


[求助] 请问谁做western blot有关VEGFR2蛋白表达定量的? 已有2人参与

我网上查的VEGFR2蛋白分子量是210KDa,或者180-190k,但是我做出来单一条带是在85k那块,不知道是怎么回事?这是我想要的VEGFR2么?
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

啊保333

铜虫 (著名写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by cherishjy at 2015-02-06 12:22:33
请问你杂VEGFR2的时候转膜buffer里面甲醇含量是多少?...

20%
8楼2015-02-06 23:23:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答

daibingling

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
widersky: 金币+5, ★★★★★最佳答案 2014-02-24 18:20:27
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-02-24 18:25:09
我做过KDR的western蛋白条带,因为分子量很大,不好出来结果,基本在靠近浓缩胶的地方。你可以尝试着延长电泳时间和转膜时间。
2楼2014-02-20 15:03:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

widersky

新虫 (小有名气)


引用回帖:
2楼: Originally posted by daibingling at 2014-02-20 15:03:14
我做过KDR的western蛋白条带,因为分子量很大,不好出来结果,基本在靠近浓缩胶的地方。你可以尝试着延长电泳时间和转膜时间。

您好~我电泳分离时间100分钟,而且用的230kda以下的预染蛋白marker观察,跑完后看到230kda离分离胶有一段距离,不是很接近。湿转260mA,横流转膜时间刚开始试过2.5h,发现转过了,滤纸上都印有marker明显的颜色,然后降到了2h,滤纸上还是有淡淡的marker颜色,这次尝试是1.5h,不知道效果怎么样。我总共做过4次,第一次啥也没出来,第二次出来单一条带在85kda,后来都是出连续多条带……下面的照片是我上次的片,这种多条带的怎么避免啊,我这次准备降低一下一抗浓度。不好意思,问题有点多~
请问谁做western blot有关VEGFR2蛋白表达定量的?
DSC09978.JPG

3楼2014-02-20 15:50:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

啊保333

铜虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-02-24 18:25:16
不知道你的一抗是哪个公司的呢,看说明书吧,我做过的VEGFR2(CST)分子量是210、230,100v 电泳分离时间100分钟,湿转250mA,横流转膜2h,还好了。
4楼2014-02-22 14:37:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 yPv6ndDtiRxQ 2026-08-11 3/150 2026-08-11 21:09 by thgx1vqMqrLw
[博后之家] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 yPv6ndDtiRxQ 2026-08-11 4/200 2026-08-11 21:03 by thgx1vqMqrLw
[教师之家] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 yPv6ndDtiRxQ 2026-08-11 3/150 2026-08-11 20:51 by thgx1vqMqrLw
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +8 Tide man 2026-08-10 9/450 2026-08-11 20:39 by beefly
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +3 majunge000 2026-08-11 4/200 2026-08-11 20:13 by lch2012
[教师之家] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 GpvwGNVshCOp 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:39 by thgx1vqMqrLw
[硕博家园] 读博的好处 +3 lnee 2026-08-11 3/150 2026-08-11 18:10 by 希望我好好的
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[论文投稿] 职称评审,求友友推荐见刊最快的期刊 +3 工厂打螺丝 2026-08-08 3/150 2026-08-11 13:42 by 会议编辑
[基金申请] FileCode能看出啥? +7 要乐观耀哥 2026-08-10 17/850 2026-08-11 10:50 by 要乐观耀哥
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +3 majunge000 2026-08-10 3/150 2026-08-10 15:46 by lch2012
[基金申请] 好奇怪的filecode +4 布布和一二 2026-08-08 5/250 2026-08-10 14:20 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 关于filecode,很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
[基金申请] 国基金的申报应该改成非等额制,评价高的钱多评价低的钱少,但是增加资助率 +7 a089 2026-08-07 7/350 2026-08-08 18:05 by gltch
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变,有变的大神么? +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
[基金申请] filecode +14 等待解的谜 2026-08-06 19/950 2026-08-07 12:20 by wlwhappy
[基金申请] 影响面上的因素 +8 布布和一二 2026-08-05 11/550 2026-08-06 10:41 by 宝贝虫子
[基金申请] 好消息?这个有何含义??? +8 Tide man 2026-08-05 10/500 2026-08-05 16:14 by xmuxiaoyu
信息提示
请填处理意见