24小时热门版块排行榜    

查看: 4955  |  回复: 12
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

widersky

新虫 (小有名气)


[求助] 请问谁做western blot有关VEGFR2蛋白表达定量的? 已有2人参与

我网上查的VEGFR2蛋白分子量是210KDa,或者180-190k,但是我做出来单一条带是在85k那块,不知道是怎么回事?这是我想要的VEGFR2么?
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cherishjy

木虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 啊保333 at 2014-02-22 14:37:04
不知道你的一抗是哪个公司的呢,看说明书吧,我做过的VEGFR2(CST)分子量是210、230,100v 电泳分离时间100分钟,湿转250mA,横流转膜2h,还好了。

请问你杂VEGFR2的时候转膜buffer里面甲醇含量是多少?
7楼2015-02-06 12:22:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答

daibingling

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
widersky: 金币+5, ★★★★★最佳答案 2014-02-24 18:20:27
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-02-24 18:25:09
我做过KDR的western蛋白条带,因为分子量很大,不好出来结果,基本在靠近浓缩胶的地方。你可以尝试着延长电泳时间和转膜时间。
2楼2014-02-20 15:03:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

widersky

新虫 (小有名气)


引用回帖:
2楼: Originally posted by daibingling at 2014-02-20 15:03:14
我做过KDR的western蛋白条带,因为分子量很大,不好出来结果,基本在靠近浓缩胶的地方。你可以尝试着延长电泳时间和转膜时间。

您好~我电泳分离时间100分钟,而且用的230kda以下的预染蛋白marker观察,跑完后看到230kda离分离胶有一段距离,不是很接近。湿转260mA,横流转膜时间刚开始试过2.5h,发现转过了,滤纸上都印有marker明显的颜色,然后降到了2h,滤纸上还是有淡淡的marker颜色,这次尝试是1.5h,不知道效果怎么样。我总共做过4次,第一次啥也没出来,第二次出来单一条带在85kda,后来都是出连续多条带……下面的照片是我上次的片,这种多条带的怎么避免啊,我这次准备降低一下一抗浓度。不好意思,问题有点多~
请问谁做western blot有关VEGFR2蛋白表达定量的?
DSC09978.JPG

3楼2014-02-20 15:50:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

啊保333

铜虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-02-24 18:25:16
不知道你的一抗是哪个公司的呢,看说明书吧,我做过的VEGFR2(CST)分子量是210、230,100v 电泳分离时间100分钟,湿转250mA,横流转膜2h,还好了。
4楼2014-02-22 14:37:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分? +9 yufeiwaner 2026-08-09 9/450 2026-08-10 12:25 by 流流伤
[基金申请] 应该是93bebmhtak前后十一个字符比较关键 +12 Lanmanbaby 2026-08-09 20/1000 2026-08-10 11:51 by 要乐观耀哥
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +5 瞬息宇宙 2026-08-10 6/300 2026-08-10 10:38 by Tide man
[基金申请] fileCode有新解读? +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
[基金申请] 关于filecode,很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +5 yang182083 2026-08-06 7/350 2026-08-08 18:29 by zhanghaozhu
[基金申请] 国基金的申报应该改成非等额制,评价高的钱多评价低的钱少,但是增加资助率 +7 a089 2026-08-07 7/350 2026-08-08 18:05 by gltch
[基金申请] 好奇怪的filecode +3 布布和一二 2026-08-08 4/200 2026-08-08 17:46 by zhanghaozhu
[基金申请] 基金中了 +14 laoda193707 2026-08-06 14/700 2026-08-08 00:23 by 实验小白ha
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] 娱乐 +6 Tide man 2026-08-03 6/300 2026-08-07 22:40 by 铁帽子农民
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变,有变的大神么? +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
[基金申请] 固定端突然变了,今天 +6 archvillain 2026-08-06 10/500 2026-08-07 16:03 by 医学老男孩
[基金申请] 听说今天filecode变了 +24 布布和一二 2026-08-06 47/2350 2026-08-07 16:02 by zhiyanjiang
[基金申请] 大家散了吧,后缀研究没有意义,别浪费时间了,过好目前的每一天,不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
[基金申请] 求各位大神看下 100+6 hpkpkpkp 2026-08-05 33/1650 2026-08-06 14:49 by zhiyanjiang
[基金申请] 影响面上的因素 +8 布布和一二 2026-08-05 11/550 2026-08-06 10:41 by 宝贝虫子
[基金申请] 8月时间戳变的,举个手。玩一下,释放压力 +9 archvillain 2026-08-04 11/550 2026-08-05 20:06 by wlwhappy
[基金申请] 纯娱乐,不喜欢勿喷 +7 Tide man 2026-08-04 10/500 2026-08-04 15:10 by loufangrui
[基金申请] 什么时候能放榜呀? +3 Jacob678 2026-08-03 3/150 2026-08-03 16:14 by gltch
信息提示
请填处理意见