应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 请问谁做western blot有关VEGFR2蛋白表达定量的？
51/1返回列表
查看: 4944  |  回复: 12
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

widersky

新虫 (小有名气)

[求助] 请问谁做western blot有关VEGFR2蛋白表达定量的？ 已有2人参与

我网上查的VEGFR2蛋白分子量是210KDa，或者180-190k，但是我做出来单一条带是在85k那块，不知道是怎么回事？这是我想要的VEGFR2么？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
1楼 2014-02-20 13:48:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

widersky

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by daibingling at 2014-02-20 15:03:14
我做过KDR的western蛋白条带，因为分子量很大，不好出来结果，基本在靠近浓缩胶的地方。你可以尝试着延长电泳时间和转膜时间。

您好~我电泳分离时间100分钟，而且用的230kda以下的预染蛋白marker观察，跑完后看到230kda离分离胶有一段距离，不是很接近。湿转260mA，横流转膜时间刚开始试过2.5h，发现转过了，滤纸上都印有marker明显的颜色，然后降到了2h，滤纸上还是有淡淡的marker颜色，这次尝试是1.5h，不知道效果怎么样。我总共做过4次，第一次啥也没出来，第二次出来单一条带在85kda，后来都是出连续多条带……下面的照片是我上次的片，这种多条带的怎么避免啊，我这次准备降低一下一抗浓度。不好意思，问题有点多~
请问谁做western blot有关VEGFR2蛋白表达定量的？
DSC09978.JPG
赞一下 回复此楼
3楼2014-02-20 15:50:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答

daibingling

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
widersky: 金币+5, ★★★★★最佳答案 2014-02-24 18:20:27
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-02-24 18:25:09
我做过KDR的western蛋白条带，因为分子量很大，不好出来结果，基本在靠近浓缩胶的地方。你可以尝试着延长电泳时间和转膜时间。
赞一下 回复此楼
2楼2014-02-20 15:03:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

啊保333

铜虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-02-24 18:25:16
不知道你的一抗是哪个公司的呢，看说明书吧，我做过的VEGFR2（CST）分子量是210、230，100v 电泳分离时间100分钟，湿转250mA，横流转膜2h，还好了。
赞一下 回复此楼
4楼2014-02-22 14:37:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

widersky

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 啊保333 at 2014-02-22 14:37:04
不知道你的一抗是哪个公司的呢，看说明书吧，我做过的VEGFR2（CST）分子量是210、230，100v 电泳分离时间100分钟，湿转250mA，横流转膜2h，还好了。

咱俩的电泳和转膜条件几乎一样，我买的R＆D的，说明书上除了写应用与WB的推荐浓度外，别的几乎没什么。。。那你是用5%脱脂牛奶配的一抗二抗还有封闭么？
赞一下 回复此楼
5楼2014-02-24 18:20:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +5 yang182083 2026-08-06 7/350 2026-08-08 18:29 by zhanghaozhu
[基金申请] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 qTvzQBRAHjCi 2026-08-07 5/250 2026-08-08 17:02 by oEVWOejN9taj
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 Vi50GxzrFcSG 2026-08-07 4/200 2026-08-08 16:27 by oEVWOejN9taj
[基金申请] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 Vi50GxzrFcSG 2026-08-07 4/200 2026-08-08 16:19 by oEVWOejN9taj
[博后之家] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 Vi50GxzrFcSG 2026-08-07 4/200 2026-08-08 16:02 by oEVWOejN9taj
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 WQyTGMbfH7Cx 2026-08-07 4/200 2026-08-08 15:02 by oEVWOejN9taj
[基金申请] fileCode有新解读？ +9 Tide man 2026-08-08 17/850 2026-08-08 14:56 by archvillain
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +5 布布和一二 2026-08-08 8/400 2026-08-08 14:54 by archvillain
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 HEQlVqMTIA7d 2026-08-07 5/250 2026-08-08 14:27 by oEVWOejN9taj
[基金申请] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 HEQlVqMTIA7d 2026-08-07 4/200 2026-08-08 14:27 by oEVWOejN9taj
[基金申请] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 KXLV3nuBVBY7 2026-08-07 5/250 2026-08-08 14:07 by oEVWOejN9taj
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 KXLV3nuBVBY7 2026-08-07 5/250 2026-08-08 14:07 by oEVWOejN9taj
[硕博家园] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 Vi50GxzrFcSG 2026-08-07 6/300 2026-08-08 10:19 by 3OOjAIS77qg2
[基金申请] 基金中了 +14 laoda193707 2026-08-06 14/700 2026-08-08 00:23 by 实验小白ha
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] 听说今天filecode变了 +24 布布和一二 2026-08-06 47/2350 2026-08-07 16:02 by zhiyanjiang
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
[基金申请] filecode +8 布布和一二 2026-08-06 11/550 2026-08-06 20:41 by tangpu318
[考博] 【2027博士申请】纳米药物递送方向 20+3 13586093586 2026-08-03 4/200 2026-08-05 09:59 by lfy8008
[基金申请] 面上提前没消息，有中的吗 +14 archvillain 2026-08-02 18/900 2026-08-04 14:42 by archvillain
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭