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Enjoy-life

新虫 (小有名气)

[求助] 支原体巢式PCR检测结果 已有2人参与

lane1-4: 为第一轮PCR结果，分别是阴性、阳性、A549和LLCPK1 ;
lane5-8: 为第二轮PCR结果，分别是阴性、阳性、A549和LLCPK1；
lane9-12: 为模板稀释3倍后的第二轮PCR结果，分别是阴性、阳性、A549和LLCPK1；
问题：为什么第二轮阴性对照中还有条带？
PS: 我们都是使用新买的迈晨的试剂盒；第一和二轮均为35循环。

请大虾们给小弟指点指点迷津，谢谢！
支原体巢式PCR检测结果
图片1.png
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理想与感性并存，急需要证明自己！
1楼 2014-02-19 19:12:28
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
Enjoy-life: 金币+3, ★★★很有帮助 2014-03-18 15:07:00
可能是气溶胶污染，NC第一轮不足以扩增出带，第二轮就扩增出。
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2楼2014-02-20 12:18:06
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youlinglyw

荣誉版主 (著名写手)

一匡天下

优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
Enjoy-life: 金币+2, ★有帮助 2014-03-18 15:07:15
你的图用原液和稀释后的模板似乎扩增差别不大啊。
1循环数是不是多了些？30上下试一试
2非特异扩增
3请尝试在巢式的时候更换引物为内引物。
赞一下(1人) 回复此楼
天行健
3楼2014-02-20 15:23:29
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