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zc10917

金虫 (正式写手)

[求助] 细胞破膜的知识求教 已有3人参与

本人是搞化学的对生物的很多东西都不是很懂,最近老板让我去玩细胞。
主要就是研究细胞里面的蛋白,使用的细胞是HepG2。细胞破膜后采用双向凝胶电泳进行分离。求教各位前辈应该采取怎么的破膜手段比较合适,另外凝胶电泳也是刚刚接触,有很多不懂得希望能得到大家的指点。
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logolover

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
zc10917: 金币+10, ★★★很有帮助 2014-02-20 14:58:48
用细胞裂解液就行啊  你要提蛋白就用试剂盒,里面会有相应的裂解液,要是染色就用3% tritonX-100 10分钟就行
4楼2014-02-19 17:07:10
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查看全部 5 个回答

farther1990

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-02-12 13:42:14
zc10917: 金币+10, ★★★很有帮助 2014-02-19 16:52:26
我是使用研磨的方式破裂细胞的哦,推荐你看《蛋白质技术手册》,里面含有常用的蛋白质分离及检测手段,里面关于凝胶电泳的操作也十分详细。我就是参考这本书进行操作的,很有用的。
不以物喜,不以己悲
2楼2014-02-12 09:52:06
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zc10917

金虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by farther1990 at 2014-02-12 09:52:06
我是使用研磨的方式破裂细胞的哦,推荐你看《蛋白质技术手册》,里面含有常用的蛋白质分离及检测手段,里面关于凝胶电泳的操作也十分详细。我就是参考这本书进行操作的,很有用的。

多谢分享经验
3楼2014-02-19 16:52:17
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wolfman840

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
zc10917: 金币+10, ★★★很有帮助 2014-02-20 14:58:28
破完后要上凝胶的话,你还是用物理方法比较好。尽量温和一些。
5楼2014-02-20 11:29:53
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