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花街小小

新虫 (初入文坛)

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[求助] 分光光度计参比、空白参比的问题。已有4人参与

我们分光光度计是那种放两个比色皿，一个一直不动作为参比，另一个用来测水样。
我测TN\TP的时候，都是用纯水较零，然后测空白样、水样、最后结果用水样减去空白样。
现在测叶绿素A，我还是先用纯水较零，然后测90%丙酮（也就是空白样），水样，最后用水样减去空白样。但是别人告诉我不应该这样。应该直接用90%丙酮较零，然后读取各水样就是应得的值。
我现在很疑惑，到底哪种正确，如果是直接用90%丙酮较零，为什么TN\TP不能直接用空白样较零呢？

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1楼 2014-01-23 00:13:03

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macylab

新虫 (初入文坛)

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【答案】应助回帖

分光光度法水质TN的测定
美析（中国）仪器有限公司
碱性过硫酸钾消解紫外分光光度法GB 11894－89
1 原理
在60℃以上水溶液中，过硫酸钾可分解产生硫酸氢钾和原子态氧，硫酸氢钾在溶液中离解而产生氢离子，故在氢氧化钠的碱性介质中可促使分解过程趋于完全。
分解出的原子态氧在120～124℃条件下，可使水样中含氮化合物的氮元素转化为硝酸盐。并且在此过程中有机物同时被氧化分解。可用紫外分光光度法于波长220和275nm处，分别测出吸光度A220及A275按式(1)求出校正吸光度A：
A＝A220－2A275……(1)
按A的值查校准曲线并计算总氮(以NO3-－N计)含量。
2仪器
2.1 美析仪器UV-1100紫外可见分光光度计一台、10mm石英比色皿一对
2.2 民用压力锅、电炉板各1个
2.3 25ml具塞玻璃磨口比色管15个（13用2备）
2.4分析天平及称量纸
2.5 漏斗及中速滤纸
2.6 1000ml容量瓶2个、100ml容量瓶1个
2.7 100ml烧杯4个（3用1备）及玻璃棒
2.8 100ml滴瓶1个、100ml塑料试剂瓶1个
2.9 0.5ml、2ml、5ml、10ml移液管1根、1ml移液管2根、洗耳球（大小各1个）
3 试剂和材料
除非另有说明外，分析时均使用符合国家标准或专业标准的分析纯试剂。
3.1无氨水蒸馏法：在1000mL蒸馏水中，加入0.10mL硫酸(p=1.84g/mL)。并在全玻璃蒸馏器中重蒸馏，弃去前50mL馏出液，然后将馏出液收集在带有玻璃塞的玻璃瓶中。
3 .2氢氧化钠溶液，200g/L：称取20mL氢氧化钠(NaOH)，溶于水(3.1)中，稀释至100mL。
3.3 氢氧化钠溶液，20g/L：将(3.2)溶液稀释10倍而得。
3.4 碱性过硫酸钾溶液：称取40g过硫酸钾(K2S2O8)，另称取15g氢氧化钠(NaOH)，溶于水(4.1)中，稀释至1000mL，溶液存放在聚乙烯瓶内，最长可贮存一周。
3.5 盐酸溶液，1＋9。
3.6 硝酸钾标准溶液。
3.6.1 硝酸钾标准贮备液，C(KNO3)＝100mg/L：硝酸钾(KNO3)在105～110℃烘箱中干燥3h，在干燥器中冷却后，称取0.7218g，溶于水中，移至1000mL容量瓶中，用水稀释至标线在0～10℃暗处保存，或加入1～2mL三氯甲烷保存，可稳定6个月。
3.6.2 硝酸钾标准使用液，C(KNO3)＝10mg/L：将贮备液用水稀释10倍而得。使用时配制。
3.7 硫酸溶液，1＋35。
4 步骤
4.1 标准曲线的绘制
（1）分别吸取0mL、0.50 mL、1.00 mL、2.00 mL、3.00 mL、5.00 mL mL、7.00 mL、8.00 mL硝酸钾标准使用溶液于25 mL比色管中，用无氨水稀释至10 mL标线。
（2）加入5 mL碱性过硫酸钾溶液，塞紧磨口塞，用纱布及纱绳裹紧管塞，以防止溅出。
（3）将比色管至于压力蒸汽消毒器中，使比色管在过热水蒸气中加热0.5h。
（4）自然冷却，开阀放气，移去外盖，取出比色管并冷至室温。
（5）加入（1+9）盐酸1ml，用蒸馏水稀释至25ml标线。
（6）.在紫外分光光度计上，以零号管溶液作参比，用10mm 石英比色皿分别在220nm及275nm波长处测定吸光度。
（7）用校正的吸光度绘制标准曲线。
4.2 样品测定步骤
取10mL水样，或去适量水样（使氮含量为20-80ug），按校准曲线绘制步骤(2)-（6）操作。按校正曲线，在校准曲线上查出相应的总氮量。
5 计算
总氮（mg/L）=m/v
式中，m为从校准曲线上查的量，ug
V为所取水样体积，mL。

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7楼2014-07-17 18:31:35

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