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jx917

银虫 (初入文坛)

[求助] DNA杂交温度 已有3人参与

现在要做三条DNA杂交的三明治结构,三条链的Tm值分别是71.73℃, 69.82℃, 83.8℃,请问一下杂交过程中的温度应该设置多少度合适?怎么计算出来的?

[ Last edited by silicare on 2014-2-17 at 11:57 ]
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bigdale

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流经验! 2014-01-13 16:59:11
jx917: 金币+8, ★★★很有帮助, 我试试 2014-01-14 10:19:50
一般情况选取中间温度,即72度。我是这么弄的。
2楼2014-01-13 15:15:17
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bigdale

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


jx917: 金币+1, 有帮助 2014-01-14 10:20:01
你可以试下,我说的方法,看看怎么样。
3楼2014-01-13 21:37:16
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jx917

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by bigdale at 2014-01-13 21:37:16
你可以试下,我说的方法,看看怎么样。

这个有没有计算公式?一般都是选取中间的温度吗?
4楼2014-01-22 18:48:00
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mxdong12

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
jx917: 金币+2, 有帮助 2014-02-17 09:43:01
杂交和你的gc含量,还有片段长度有关吧

[ 发自小木虫客户端 ]
5楼2014-01-23 06:10:44
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jx917

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by mxdong12 at 2014-01-23 06:10:44
杂交和你的gc含量,还有片段长度有关吧

这个我知道,可是具体怎么相关呢?
6楼2014-02-17 09:44:39
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mxdong12

金虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by jx917 at 2014-02-17 09:44:39
这个我知道,可是具体怎么相关呢?...

有个公式,你去网上搜搜

[ 发自小木虫客户端 ]
7楼2014-02-17 10:00:01
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forrestgump

新虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
jx917: 金币+4, 有帮助 2014-03-03 09:13:59
75摄氏度你试一试,这个最好做一个梯度!
8楼2014-02-17 12:26:32
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wty_wty

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by bigdale at 2014-01-13 15:15:17
一般情况选取中间温度,即72度。我是这么弄的。

请问是在杂交的整个过程中都保持这个温度吗?还是,保持这个温度多久,然后让它自然降温到室温呢?
9楼2018-03-06 11:14:44
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