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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸杂交 » DNA杂交温度
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jx917

银虫 (初入文坛)

[求助] DNA杂交温度 已有3人参与

现在要做三条DNA杂交的三明治结构，三条链的Tm值分别是71.73℃, 69.82℃, 83.8℃，请问一下杂交过程中的温度应该设置多少度合适？怎么计算出来的？

[ Last edited by silicare on 2014-2-17 at 11:57 ]
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1楼 2014-01-13 14:40:30
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bigdale

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流经验！ 2014-01-13 16:59:11
jx917: 金币+8, ★★★很有帮助, 我试试 2014-01-14 10:19:50
一般情况选取中间温度，即72度。我是这么弄的。
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2楼2014-01-13 15:15:17
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bigdale

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
jx917: 金币+1, ★有帮助 2014-01-14 10:20:01
你可以试下，我说的方法，看看怎么样。
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3楼2014-01-13 21:37:16
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jx917

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by bigdale at 2014-01-13 21:37:16
你可以试下，我说的方法，看看怎么样。

这个有没有计算公式？一般都是选取中间的温度吗？
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4楼2014-01-22 18:48:00
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mxdong12

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
jx917: 金币+2, ★有帮助 2014-02-17 09:43:01
杂交和你的gc含量，还有片段长度有关吧

[ 发自小木虫客户端 ]
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5楼2014-01-23 06:10:44
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jx917

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by mxdong12 at 2014-01-23 06:10:44
杂交和你的gc含量，还有片段长度有关吧

这个我知道，可是具体怎么相关呢？
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6楼2014-02-17 09:44:39
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mxdong12

金虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by jx917 at 2014-02-17 09:44:39
这个我知道，可是具体怎么相关呢？...

有个公式，你去网上搜搜

[ 发自小木虫客户端 ]
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7楼2014-02-17 10:00:01
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forrestgump

新虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
jx917: 金币+4, ★有帮助 2014-03-03 09:13:59
75摄氏度你试一试，这个最好做一个梯度！
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8楼2014-02-17 12:26:32
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wty_wty

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by bigdale at 2014-01-13 15:15:17
一般情况选取中间温度，即72度。我是这么弄的。

请问是在杂交的整个过程中都保持这个温度吗？还是，保持这个温度多久，然后让它自然降温到室温呢？
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9楼2018-03-06 11:14:44
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