24小时热门版块排行榜    

查看: 2897  |  回复: 11
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

gdh2009095

铜虫 (初入文坛)

[求助] Hela细胞 96孔板 MTT 已有4人参与

各位,我养了半年多的hela细胞,在细胞培养瓶中细胞能正常贴壁,就是里面有很多的小黑点,而且还有少量的死细胞,我一般使用10%FBS+1640进行培养,0.25%EDTA-TYpton消化1-2min,然后加培养基终止,离心5min,分装1:3,然后铺96孔板中后,贴壁24小时后死亡的细胞就会很明显,所以做MTT时,最后的OD值总是上不去,只有对照空只有0.3左右,试了大半年的时间也不可以,麻烦大家帮帮忙,分析一下看是不是我养细胞的过程有哪些问题!跪谢了!
还有就是在养Hela的时候用在1640中加丙酮酸钠吗?是不是不加就不可以?
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

乔丹希尔

金虫 (著名写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 华农夏田 at 2014-08-12 09:40:38
你现在还要hela 细胞么?可以的话我想跟你交换MCF-7,HT-29,A549,我在武汉。...

你的三种细胞能赠送吗  我的细胞  全部被黑胶虫污染了
愿结交更多志同道合的人一块前行!!
9楼2015-03-27 23:35:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

daibingling

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我养Hela细胞的时候没有加丙酮酸钠,我觉得你在培养瓶中的细胞状态就不好,然后消化后接孔板死的就特别多。你可以用不加EDTA的胰酶消化,然后在培养的时候加点红霉素(我觉得小黑点应该是黑胶虫),还有接96孔板时,多接点细胞
2楼2014-01-09 14:38:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zs_0716

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
有小黑点的细胞根本不能使用,因为到每孔100ul的环境,细胞非药物致死会很多,根本测不出药物的活性,建议换细胞,一般挽救的效果并不好,如果换后数值仍低,应先暂停实验,观察2-3天细胞状态,应在细胞长势良好且每次换培养基不论颜色如何但很清澈的情况下再进行实验,根据细胞的长势来确定铺板的细胞数,疯长时期有时每孔4000就行,状态一般时我铺过5500
3楼2014-01-11 11:19:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zs_0716

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

如果铺板24H后,贴壁效果差就不要继续实验了,否则真的是浪费资源和自己的时间。24h后一般Hela细胞长势都是特别良好的,几乎全部贴壁。而且形态是饱满的。铺板时一定要主要不要污染,很多时候细胞在培养瓶长的很好,但就因铺板操作污染使实验前功尽弃的
4楼2014-01-11 11:23:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +10 kulium 2026-08-21 13/650 2026-08-21 21:58 by alongwaytogo
[基金申请] 今日不放榜?网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +16 医学老男孩 2026-08-20 20/1000 2026-08-21 21:13 by Ldrop2023
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +11 ziyangfang 2026-08-19 14/700 2026-08-21 16:51 by applepetty
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +23 yaoyewhu2008 2026-08-20 25/1250 2026-08-21 12:19 by Poppy1104
[基金申请] 什么时候开奖? +7 CrisMessi 2026-08-18 7/350 2026-08-21 12:15 by weiyin
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +15 archvillain 2026-08-15 27/1350 2026-08-21 11:32 by tim76
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +15 kkkl_v 2026-08-19 16/800 2026-08-21 11:22 by 365372687
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧? +4 哈哈蛤? 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 放榜前的不淡定 40+4 snowwithsea 2026-08-19 13/650 2026-08-21 08:30 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 估计是周四 +3 archvillain 2026-08-18 3/150 2026-08-21 01:48 by jnhyjjm
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +10 zju2000 2026-08-16 11/550 2026-08-20 20:02 by cl479861084
[基金申请] 时间戳变了,能看出什么问题? +18 基诺咪客 2026-08-17 23/1150 2026-08-20 17:19 by Godzela
[教师之家] 为什么余额宝的年化利率越来越低?主要原因有哪些? +5 瞬息宇宙 2026-08-15 5/250 2026-08-19 20:23 by super2002521
[基金申请] 今天放榜吗? +14 布布和一二 2026-08-19 15/750 2026-08-19 18:07 by gltch
[基金申请] 2027广东省杰青 +4 奶牛小黑 2026-08-15 10/500 2026-08-19 11:02 by wanfengnew
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +4 且听虎啸 2026-08-17 5/250 2026-08-18 00:49 by 蔡棒棒菂
信息提示
请填处理意见