【答案】应助回帖

» 猜你喜欢

含氟糖皮质激素的外用抗炎利器醋酸氟轻松已经有0人回复
阿莫奈韦（Amenamevir）：解旋酶-引物酶靶向分子的结构特征与合成路径全解析已经有0人回复
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费? 已经有165人回复
利瑞鲁单抗：靶向KIR的NK细胞检查点工具抗体，结构基础与科研应用全解析已经有0人回复
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析已经有0人回复
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析已经有0人回复
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析已经有0人回复
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析已经有0人回复
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点已经有0人回复
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂已经有0人回复

1楼 2014-01-08 23:12:56

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

MolEPI: 10
应助: 1662 (讲师)
金币: 8693.8
红花: 72
帖子: 3516
在线: 456小时
虫号: 1614001
注册: 2012-02-13
专业: 生物化学

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-01-09 08:51:59
LYSH1103: 金币+1, ★★★很有帮助, 我金币太少了，不够分啊，因为是新虫。。吱吱 2014-01-14 09:46:48

可能是模板用量不正确。而且样品里含有RNA，可能影响引物与模板的结合。

2楼2014-01-09 02:14:10

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

梦若冰凌80

新虫 (初入文坛)

应助: 1 (幼儿园)
金币: 8.6
帖子: 5
在线: 7.6小时
虫号: 2922155
注册: 2014-01-09
专业: 植物生理与生化

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
LYSH1103: 金币+1, 我的金币不够啦，，新虫穷啊。。。嘎嘎 2014-01-14 09:47:21

胶和电泳的问题，之前遇到过，一个是胶做的不合适，一个电泳仪设置的有问题，前者的可能性比较大

4楼2014-01-09 10:39:21

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

MolEPI: 10
应助: 1662 (讲师)
金币: 8693.8
红花: 72
帖子: 3516
在线: 456小时
虫号: 1614001
注册: 2012-02-13
专业: 生物化学

引用回帖:

3楼: Originally posted by LYSH1103 at 2014-01-09 08:07:43
我测了我稀释后DNA的浓度，是20-80ng不等。50微升用1微升。...

因为样品里有RNA和其它杂质，可能需要适当增加镁离子浓度或者降低退火温度。

6楼2014-01-09 12:24:13

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

ruikun

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 0.5
帖子: 2
在线: 1.7小时
虫号: 1429989
注册: 2011-10-07
专业: 作物种质资源与遗传育种学

请问楼主问题解决了吗？我最近也出现了这样的问题，很需要指点啊!!

7楼2014-01-09 16:57:28

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

yuanbeauty

金虫 (正式写手)

应助: 13 (小学生)
金币: 1609.1
散金: 34
红花: 2
帖子: 401
在线: 179.3小时
虫号: 976788
注册: 2010-03-20
专业: 作物种质资源与遗传育种学

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
LYSH1103: 金币+1, ★★★很有帮助, 金币不够分啊。。新虫。。吱吱 2014-01-14 09:48:29

DNA电泳图是稀释后的吗？另外，前几次能P出来，后又P不出来，这几次用的是相同的DNA模板吗？

DNA浓度过高，会没有产物的。这是我们的经验，供参考。

8楼2014-01-09 18:13:30

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

普通回帖

LYSH1103

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 27.5
帖子: 11
在线: 3.6小时
虫号: 2767735
注册: 2013-10-31
专业: 植物遗传学

引用回帖:

2楼: Originally posted by cicelyzh at 2014-01-09 02:14:10
可能是模板用量不正确。而且样品里含有RNA，可能影响引物与模板的结合。

我测了我稀释后DNA的浓度，是20-80ng不等。50微升用1微升。

3楼2014-01-09 08:07:43

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

LYSH1103

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 27.5
帖子: 11
在线: 3.6小时
虫号: 2767735
注册: 2013-10-31
专业: 植物遗传学

这个现象持续20天了。我做1.0的胶，电泳仪大家都用一个，别人能跑出来啊！PCR仪我也换着用过了。还是一样。。。我就有点崩溃啊。。。

5楼2014-01-09 11:37:07

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

LYSH1103

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 27.5
帖子: 11
在线: 3.6小时
虫号: 2767735
注册: 2013-10-31
专业: 植物遗传学

引用回帖:

6楼: Originally posted by cicelyzh at 2014-01-09 12:24:13
因为样品里有RNA和其它杂质，可能需要适当增加镁离子浓度或者降低退火温度。...

我在提取DNA的时候已经用过RNase A .其他杂质这个就。。。难弄啦。。。。我用的是降落式PCR程序，55-65度，还要再低点吗？出现问题后我也试过45-55度和50-60度。酶有结果啊。镁离子这个我倒是没有提高。因为我觉得体系没有问题。之前很好啊。对了，我也怀疑过DNA质量，我也新提取了DNA，还是一个样子。。。

9楼2014-01-11 20:42:08

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

LYSH1103

新虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 27.5
帖子: 11
在线: 3.6小时
虫号: 2767735
注册: 2013-10-31
专业: 植物遗传学

引用回帖:

8楼: Originally posted by yuanbeauty at 2014-01-09 18:13:30
DNA电泳图是稀释后的吗？另外，前几次能P出来，后又P不出来，这几次用的是相同的DNA模板吗？

DNA浓度过高，会没有产物的。这是我们的经验，供参考。

DNA 的图是原样品的。是的用的相同的DNA ,后来又新提取了DNA，还是相同的效果。就很崩溃。所以请教给位大神啊。。。