应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 植物gDNA为模板，PCR前几次出现清晰条带，后面出现涂抹型条带是什么原因？
52/1返回列表
查看: 2224  |  回复: 15
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

LYSH1103

新虫 (初入文坛)

[求助] 植物gDNA为模板，PCR前几次出现清晰条带，后面出现涂抹型条带是什么原因？ 已有5人参与

我是PCR后进行测序，第一副图是之前的PCR，第二份图是P不出来的图。最后的图片是DNA的质量。体系时50微升的。同KOD酶和普通Taq都是出现相同的现象。求各位指点。
植物gDNA为模板，PCR前几次出现清晰条带，后面出现涂抹型条带是什么原因？
EAT{8376LQXT15[(7[BZ~[9.jpg


植物gDNA为模板，PCR前几次出现清晰条带，后面出现涂抹型条带是什么原因？-1
FIGG92XIJMFH{1UAF@PXA5U.jpg


植物gDNA为模板，PCR前几次出现清晰条带，后面出现涂抹型条带是什么原因？-2
$1EL}$A]K1D(EO$PK%D4}_U.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2014-01-08 23:12:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
引用回帖:
9楼: Originally posted by LYSH1103 at 2014-01-11 20:42:08
我在提取DNA的时候已经用过RNase A .其他杂质这个就。。。难弄啦。。。。我用的是降落式PCR程序，55-65度，还要再低点吗？出现问题后我也试过45-55度和50-60度。酶有结果啊。镁离子这个我倒是没有提高。因为我觉得 ...

PCR时可以用以前提出来的WT模板做阳性对照，看看是不是体系的问题。
赞一下 回复此楼
14楼2014-01-12 02:29:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 16 个回答

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-01-09 08:51:59
LYSH1103: 金币+1, ★★★很有帮助, 我金币太少了，不够分啊，因为是新虫 。。吱吱 2014-01-14 09:46:48
可能是模板用量不正确。而且样品里含有RNA，可能影响引物与模板的结合。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2014-01-09 02:14:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

LYSH1103

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2014-01-09 02:14:10
可能是模板用量不正确。而且样品里含有RNA，可能影响引物与模板的结合。

我测了我稀释后DNA的浓度，是20-80ng不等。50微升用1微升。
赞一下 回复此楼
3楼2014-01-09 08:07:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

梦若冰凌80

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
LYSH1103: 金币+1, 我的金币不够啦，，新虫穷啊。。。嘎嘎 2014-01-14 09:47:21
胶和电泳的问题，之前遇到过，一个是胶做的不合适，一个电泳仪设置的有问题，前者的可能性比较大
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2014-01-09 10:39:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 16 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 情人节自我反思：在爱情中有过遗憾吗？ +5 瞬息宇宙 2026-02-15 6/300 2026-02-18 12:51 by 月下雪林
[找工作] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 i3cz6qj6l2 2026-02-17 3/150 2026-02-18 11:09 by lqtl9djx19
[考博] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 i3cz6qj6l2 2026-02-17 3/150 2026-02-18 10:54 by lqtl9djx19
[考研] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 i3cz6qj6l2 2026-02-17 3/150 2026-02-18 10:39 by lqtl9djx19
[考研] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-17 3/150 2026-02-18 08:53 by lqtl9djx19
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-17 3/150 2026-02-18 08:38 by lqtl9djx19
[找工作] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +4 pnpwoqbg8f 2026-02-17 4/200 2026-02-18 07:55 by lotyj5cz79
[基金申请] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-16 4/200 2026-02-18 07:40 by lotyj5cz79
[考研] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +4 pnpwoqbg8f 2026-02-16 4/200 2026-02-18 07:38 by lotyj5cz79
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +4 pnpwoqbg8f 2026-02-16 4/200 2026-02-18 07:23 by lotyj5cz79
[论文投稿] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +4 pnpwoqbg8f 2026-02-16 4/200 2026-02-18 07:08 by lotyj5cz79
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-16 3/150 2026-02-18 06:53 by lotyj5cz79
[论文投稿] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-17 3/150 2026-02-18 00:40 by tk2gfblvuz
[找工作] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-17 4/200 2026-02-18 00:23 by tk2gfblvuz
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 pnpwoqbg8f 2026-02-17 3/150 2026-02-17 23:40 by tk2gfblvuz
[基金申请] 基金正文30页指的是报告正文还是整个申请书 +3 successhe 2026-02-16 4/200 2026-02-17 20:56 by successhe
[基金申请] 今年春晚有几个节目很不错，点赞！ +5 瞬息宇宙 2026-02-16 6/300 2026-02-17 12:49 by jymy19840415
[微米和纳米] 球磨粉体时遇到了大的问题，请指教！ 10+3 6sbiam 2026-02-12 15/750 2026-02-16 15:03 by tgzxzqj
[基金申请] 过年走亲戚时感受到了所开私家车的鄙视链 +3 瞬息宇宙 2026-02-15 5/250 2026-02-16 14:23 by aspect3000
[硕博家园] 江汉大学解明教授课题组招博士研究生/博士后 +3 cleverlyy 2026-02-12 3/150 2026-02-12 21:02 by qsdf1
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭