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三蛰

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
10楼: Originally posted by 猫di阁楼 at 2014-02-26 22:23:49
我也是遇到同样的问题,转化后的酵母在抗性板上张得很欢快,可是PCR验证就是不对,我判断是发生了非同源交换,情况和你的很像。
不知道你现在情况如何了?我现在是想多做几次看看能不能成,我的同源部分各有700BP, ...

我现在开始怀疑我的抗性板子是否有效,导致我调取的菌落不一定是阳性的。我在换板子筛选,一个多月了,我都憔悴了,很简单的一个实验我就是搞不定了。。。
我不会!
11楼2014-02-27 10:49:03
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猫di阁楼

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
11楼: Originally posted by 三蛰 at 2014-02-27 10:49:03
我现在开始怀疑我的抗性板子是否有效,导致我调取的菌落不一定是阳性的。我在换板子筛选,一个多月了,我都憔悴了,很简单的一个实验我就是搞不定了。。。...

加油啊..我也和很多同学讨论过抱怨过,不过都做到这一步了,找找原因还是可以做下去的!共勉!
12楼2014-03-01 23:23:26
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李云飞001

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

lz弄出原因了吗?最近做也是这种情况!
13楼2014-05-14 14:56:04
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xiaoxiaosu1905

金虫 (初入文坛)

引用回帖:
11楼: Originally posted by 三蛰 at 2014-02-27 10:49:03
我现在开始怀疑我的抗性板子是否有效,导致我调取的菌落不一定是阳性的。我在换板子筛选,一个多月了,我都憔悴了,很简单的一个实验我就是搞不定了。。。...

LZ问题解决了吗?我也遇到类似问题,换各种条件各种方法都不行,折腾了快一年了。一直持续不断试。
14楼2014-10-07 08:49:54
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韩蕾6862

新虫 (初入文坛)

你现在做出来了吗?我也遇到了同样的问题,是怎么回事呢?
15楼2014-11-28 20:07:35
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小晖晖在复旦

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
10楼: Originally posted by 猫di阁楼 at 2014-02-26 22:23:49
我也是遇到同样的问题,转化后的酵母在抗性板上张得很欢快,可是PCR验证就是不对,我判断是发生了非同源交换,情况和你的很像。
不知道你现在情况如何了?我现在是想多做几次看看能不能成,我的同源部分各有700BP, ...

我现在也遇到你的这个问题,同源部分现在是300,也不成功,你的问题解决了么?跪求指导啊
16楼2014-12-24 13:46:46
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jackweller

新虫 (初入文坛)

我也遇到了这样的情况,纯化菌后,还是一样PCR出两条带,请问这种问题怎么解决呀
17楼2015-08-23 23:39:55
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J1663141418

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

请问解决了吗?PCR验证阳性克隆快要疯掉了
18楼2019-08-05 20:53:58
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本帖内容被屏蔽

19楼2024-09-27 20:57:26
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