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sunny814198

新虫 (初入文坛)

[求助] 200元求一株基因组上有抗性的大肠杆菌 已有1人参与

200元求一株有抗性的大肠杆菌DH5a   抗性要在基因组上(不是含有抗性的质粒),抗性最好是庆大,四环素,红霉素等,不能是卡纳,氯霉素抗性。谢谢。
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huangrui1988

铜虫 (小有名气)


【答案】应助回帖

我有合适的菌株。你把你的方式给我吧。
2楼2014-01-31 21:00:14
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Lau_Kimura

铁虫 (正式写手)

lz可以自己诱变筛选啊。

诱变筛选实验方案:
1. 小大摇菌以准备1L的DH5a大肠杆菌(OD>1)。
2. 加入0.01%EMS化学诱变剂,混匀后静置30min 。
3. 4,000 rpm 15min弃上清,10%甘油洗涤三次。
4. 加入10mL 2YT重悬浮后,分别取100μL均匀涂布于含有相应抗生素的LB固体培养基(100个)。
5. 37度过夜培养。
3楼2014-01-31 22:13:44
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