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细菌抗生素抗性诱导 已有3人参与
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| 我的野生病原细菌不抗利福平，请问如何诱导我的菌具备利福平抗性呢？求教，谢谢。 |
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5楼2013-12-28 02:50:54
zhaozhibozhi
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2楼2013-12-24 22:08:26
3楼2013-12-27 12:42:53
【答案】应助回帖
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什么菌啊？是结核分枝杆菌吗？ 如果是，则要注意了，对结核分枝杆菌野生株的人工诱导耐药是有一定社会潜在危害性的，千万不要流传出去，操作者自己也要小心，尽量操作时注意防护，操作后污染物处理到位，好像对这类菌的耐药诱导研究，WHO是有严格规定的。 如果是其他常见病原菌，有两种常用方法诱导，两种方法一般都需要先测定利福平对这株菌的MIC值： 1）一步法：用CLSI等提供的这类菌对利福平的耐药水平浓度加入到新鲜培养的菌液中直接振荡培养诱导，培养后将菌液离心浓缩然后涂布在含同样耐药水平利福平的琼脂平板上，前提是菌液体积要大些，保证有足够总量细菌，因一般细菌的自发突变率在10-7~10-10水平，理论上你初始接种的菌量应在10+10cfu水平。筛到的阳性耐药突变株以后一直用含抗性的平板维持培养。 2）多步法：先用低于MIC浓度利福平培养菌液，然后转种至含MIC水平利福平的培养基中，再转种至更高水平利福平的培养基中，以此类推，逐步提高抗生素浓度，最后再将菌液涂布在高利福平浓度（最好就是耐药标准的）的琼脂平板上，如果多次传代后仍保持这种水平抗性的，就是稳定的耐药突变株了。 |
4楼2013-12-28 00:15:20
