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我听五月天

木虫 (正式写手)

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性别: GG
专业: 抗肿瘤药物药理

[求助] 细胞培养过程中培养液变黄已有11人参与

跟别人要的海拉细胞（DMEM培养的），传代两次后就挂了。期间，拿到细胞第二天就看到细胞轮廓开始变得不清晰、不透亮。之后细胞培养液（都是1640高糖）一天内就变黄，一天早晚换两次。后来轮廓更不清晰、细胞更不透亮。就改用DMEM培养，更换两次培养液后培养液浑浊了，显微镜下的细胞看上去都好像烧过的纸一样。就丢弃了。请教大神们这是什么原因？？？？？

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为爱而生

1楼 2013-12-23 15:59:48

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

肖颖2009

铁虫 (正式写手)

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【答案】应助回帖

引用回帖:

8楼: Originally posted by 我听五月天 at 2013-12-25 14:00:54
Hela细胞是癌细胞不是能无限传代吗？操作时图方便，有时让别人做实验就让他给换液。我知道传代会影响细胞，正常细胞L-929，因为养成后暂时不用就消化过两次，每次大部分冻存，小部分继续培养，这样大概隔天甚至每天 ...

应该是换液的时候有污染，培养基浑浊一般是细菌污染。细胞长到90%的密度肯定是需要传代的，如果你不想冻存可以选择丢弃，留一部分继续培养。细胞密度大却不传代、不消化，就算没有发生污染细胞状态也会受影响的，会变老。