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yingq1

木虫 (小有名气)

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[求助] 相互作用蛋白通过分子筛后洗脱时间为什么延长？

LZ现在在做两个蛋白的相互作用，在E。coli里面分别表达两种蛋白并用HIS标签纯化后成功得到大量两种蛋白。然后在体外混合两种蛋白后过分子筛，发现两种蛋白的洗脱时间都延长了（怀疑两个蛋白都变小了？），但是把过柱子后收集的样品跑SDS电泳后发现两种蛋白大小都未变化，请大家说下还有什么可能的原因？

以下先排除几种可能：
1，柱子是预装柱没有问题，且做过上述试验后，又用同一个柱子分别跑了两种蛋白，分子量和预期相同。
2，其中一个蛋白是单体，另外一个是4聚体。如果四聚体变小了有这种可能，但是另外一个蛋白是单体，无论如何也不会变小的。

请大家不吝指教，多谢了！

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