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一月lyj

木虫 (小有名气)

[求助] 蛋白质聚集可能产生活性氧，如何检测到这个活性氧呢？

文献上有报道蛋白质聚集会产生活性氧物种-过氧化氢，通过加入亚铁离子，产生羟基自由基，在顺磁检测到信号。可是，为什么我做的信号不对，要么连信号都没有。不知道这个顺磁检测的话，具体应该如何操作啊？是不是要很迅速的配好溶液立刻检测，还是等待反应一段时间后再检测？或者有什么更好的证明体系中有活性氧物种存在的方法和技术呀？求指教啊！！！
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1楼 2013-12-19 16:45:53
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pennchem

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

文献上有报道蛋白质聚集会产生活性氧物种-过氧化氢, 是什么蛋白？如何能聚集？
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行至水穷处，坐看云起时
4楼2013-12-19 17:19:37
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pennchem

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
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一月lyj: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-12-24 11:04:21
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-01-27 23:04:36
楼上说的是ESR或者是EPR检测自由基吗？

自由基很容易淬灭，所以buffer要考虑着一点

此外，最好有对照来证明你的EPR操作是正常的
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行至水穷处，坐看云起时
2楼2013-12-19 16:55:14
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一月lyj

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by pennchem at 2013-12-19 16:55:14
楼上说的是ESR或者是EPR检测自由基吗？

自由基很容易淬灭，所以buffer要考虑着一点

此外，最好有对照来证明你的EPR操作是正常的

是呀，我的buffer选的PBS。应该选什么样的buffer吗？用了捕获剂。做了硫酸亚铁和双氧水的反应，确实检测到标准的羟基自由基的峰形，但是我的蛋白就没有这样的峰形。
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3楼2013-12-19 17:15:06
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一月lyj

木虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by pennchem at 2013-12-19 17:19:37
文献上有报道蛋白质聚集会产生活性氧物种-过氧化氢, 是什么蛋白？如何能聚集？

Aβ40，PrP121-231，PrP106-126,这些蛋白都报道过。培养一段时间，加捕获剂，加亚铁离子，就能检测到。缓冲溶液选什么呢？
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5楼2013-12-24 10:51:04
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