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有用流式细胞仪做过细菌计数的吗？求教
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最近用流式细胞仪测定抗体浓度（ELISA在细菌铺板时，结合力很差，故而舍弃），目前在模板建立（用不同浓度未经处理细菌—b型流感嗜血杆菌—调参数）遇到一些困难，求指教。 1、由于要计数样品为细菌，较细胞小，将FSC电压设为E01。用不同细菌浓度预实验时，在LO、MED、HI流速时每秒检测到细胞数差别很大，例如：不论浓度怎样变化，在LO是基本不变（都是隔几秒能检测到一个15）；而MED和HI相差很大，这正常吗？ 后来试了下FSC电压为E02，这个在LO、MED、HI间变化倒是比较规律，但是不论用84和水怎样冲洗都会在冲洗时检测到大量信号，这是为什么（水是二级）？还有就是在E02是，未经处理细菌不论怎样调节参数在柱状图上都只能跑出正态分布图的后半部分，为什么？ 2、据做细胞的人说每秒流过80-90个细胞最好，细菌每秒流过多少合适？  2013-12-17 16.51.33.jpg |
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liuweipeng
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