应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 集胞藻6803突变株的纯化问题
101/1返回列表
查看: 1069  |  回复: 9
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

冉兆星

木虫 (小有名气)

[求助] 集胞藻6803突变株的纯化问题 已有1人参与

用氯霉素插入失活目的基因的方法获得集胞藻6803突变株，在平板上继代三、四后发现还有很多细菌长在藻周围，转到液体培养基后发现细菌很多，液体浑浊，无法纯化突变株，同时因为这些细菌的存在还影响藻的生理活性。请问有什么方法可以较大程度去除这些细菌？请不吝指教！谢谢！
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2013-12-13 11:37:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
冉兆星: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-12-15 10:29:15
纯化6803很麻烦。划线，挑单克隆继续划线。
赞一下 回复此楼
2楼2013-12-13 15:34:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冉兆星

木虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-12-13 15:34:45
纯化6803很麻烦。划线，挑单克隆继续划线。

如果加大氯霉素的用量会有效果吗？听说相对于kana插入突变而言，氯霉素插入突变不容易纯化。
赞一下 回复此楼
3楼2013-12-14 10:19:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 冉兆星 at 2013-12-14 10:19:43
如果加大氯霉素的用量会有效果吗？听说相对于kana插入突变而言，氯霉素插入突变不容易纯化。...

如果你本身用氯霉素抗性平板了，说明这些菌也是有氯霉素抗性的，而且细菌的氯霉素耐受性比蓝藻强，所以我觉得用处不大。慢慢划线纯化，通常需要花两三个月。问一下你的野生6803藻种纯吗？通常做个转化不至于污染的，我怀疑你的野生藻有问题。如果野生藻没有问题，可以试试重新转化。
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2013-12-14 11:11:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冉兆星

木虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-12-14 11:11:40
如果你本身用氯霉素抗性平板了，说明这些菌也是有氯霉素抗性的，而且细菌的氯霉素耐受性比蓝藻强，所以我觉得用处不大。慢慢划线纯化，通常需要花两三个月。问一下你的野生6803藻种纯吗？通常做个转化不至于污染的 ...

野生藻进行转化实验后涂板生长一周时间后，在平板（含氯霉素）上出现菌斑，菌斑不大，但数量不少。
赞一下 回复此楼
5楼2013-12-14 14:05:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 冉兆星 at 2013-12-14 14:05:50
野生藻进行转化实验后涂板生长一周时间后，在平板（含氯霉素）上出现菌斑，菌斑不大，但数量不少。...

我是问下你的野生藻是否有菌。如果没有菌的话说明是你转化时引入的，要么从污染的突变株纯化，要么可以重新转化野生藻。
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2013-12-14 14:54:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

冉兆星

木虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-12-14 14:54:56
我是问下你的野生藻是否有菌。如果没有菌的话说明是你转化时引入的，要么从污染的突变株纯化，要么可以重新转化野生藻。...

有菌！这样的话就要重新转化野生藻。我现在需要做是先把野生藻纯化了，然后转化，是这样吧？
赞一下 回复此楼
7楼2013-12-15 08:57:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 冉兆星 at 2013-12-15 08:57:59
有菌！这样的话就要重新转化野生藻。我现在需要做是先把野生藻纯化了，然后转化，是这样吧？...

是的。如果野生藻不纯就很麻烦了。不过，你可以同时纯化野生藻和突变株，省些时间。
赞一下 回复此楼
8楼2013-12-15 09:09:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

叶鹏林1

新虫 (小有名气)
我将质粒转入6803蓝藻中，在sp（壮观霉素)筛选下，涂板挑单克隆，然后划线，再在液体sp抗性的BG11中培养，反复传带（很少的量)，都能长起来，但是提基因组鉴定都不是。这种情况是继续传带还是怎么办？

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
9楼2019-10-20 22:45:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

叶鹏林1

新虫 (小有名气)
楼主我也遇到类似的情况

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
10楼2019-10-20 22:46:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 冉兆星 的主题更新
101/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0854 考研调剂 招生了！AI 方向 +3 pk3725069 2026-03-19 14/700 2026-03-23 14:44 by Jack_333
[考研] 306求调剂 +9 chuanzhu川烛 2026-03-18 9/450 2026-03-23 13:17 by luoyongfeng
[考研] 293求调剂 +3 涛涛Wjt 2026-03-22 5/250 2026-03-22 22:21 by jiangpengfei
[考研] 311求调剂 +6 冬十三 2026-03-18 6/300 2026-03-22 20:18 by edmund7
[考研] 311求调剂 +3 26研0 2026-03-20 3/150 2026-03-22 14:46 by ColorlessPI
[考研] 材料学硕333求调剂 +3 北道巷 2026-03-18 3/150 2026-03-21 18:17 by 学员8dgXkO
[考研] 299求调剂 +5 shxchem 2026-03-20 7/350 2026-03-21 17:09 by ColorlessPI
[考研] 266求调剂 +3 哇呼哼呼哼 2026-03-20 3/150 2026-03-21 16:46 by barlinike
[考研] 332求调剂 +3 凤凰院丁真 2026-03-20 3/150 2026-03-21 10:27 by luoyongfeng
[考研] 材料学学硕080502 337求调剂-一志愿华中科技大学 +4 顺顺顺mr 2026-03-18 5/250 2026-03-21 10:22 by luoyongfeng
[考研] 085601调剂 358分 +3 zzzzggh 2026-03-20 4/200 2026-03-21 10:21 by luoyongfeng
[考研] 南昌大学材料专硕311分求调剂 +6 77chaselx 2026-03-20 6/300 2026-03-21 07:24 by JourneyLucky
[考研] 华东师范大学-071000生物学-293分-求调剂 +3 研究生何瑶明 2026-03-18 3/150 2026-03-21 01:30 by JourneyLucky
[考研] 一志愿华中科技大学，080502，354分求调剂 +5 守候夕阳CF 2026-03-18 5/250 2026-03-21 01:06 by JourneyLucky
[考研] 一志愿 西北大学 ，070300化学学硕，总分287，双非一本，求调剂。 +3 晨昏线与星海 2026-03-18 3/150 2026-03-21 00:46 by JourneyLucky
[考研] 304求调剂 +6 曼殊2266 2026-03-18 6/300 2026-03-21 00:32 by JourneyLucky
[考研] 材料学求调剂 +4 Stella_Yao 2026-03-20 4/200 2026-03-20 20:28 by ms629
[考研] 0856调剂，是学校就去 +8 sllhht 2026-03-19 9/450 2026-03-20 14:25 by 无懈可击111
[考研] 0703化学调剂 +4 18889395102 2026-03-18 4/200 2026-03-19 16:13 by 30660438
[考研] 085600材料与化工调剂 324分 +10 llllkkkhh 2026-03-18 12/600 2026-03-19 14:33 by llllkkkhh
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭