应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 引物
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
81/1返回列表
查看: 1345  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

文飞778899

银虫 (小有名气)

[求助] 引物

在一个PCR反应体系中，有多条正反引物，稀释引物时把他们稀释在同一管中，使用时直接从一管中取适量用于PCR扩增。想请问大神们，把多条引物稀释在同一管中对PCR扩增有影响吗，是不是很容易形成引物二聚体！??!谢谢指教～～～！！！
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2013-12-09 18:14:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2013-12-10 14:57:19
文飞778899: 金币+3, ★有帮助 2013-12-11 21:17:27
你做的是multiple PCR，如果想做multiple PCR，在引物设计的时候就要统筹兼顾的，现在既然你已经设计好了，那你就混一起跑个电泳试试呗，建议稀释引物的时候，还是单独稀释比较好，实在常用，可以取少量做mix
赞一下(1人) 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

文飞778899
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
2楼2013-12-09 18:16:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

文飞778899

银虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by gyesang at 2013-12-09 18:16:22
你做的是multiple PCR，如果想做multiple PCR，在引物设计的时候就要统筹兼顾的，现在既然你已经设计好了，那你就混一起跑个电泳试试呗，建议稀释引物的时候，还是单独稀释比较好，实在常用，可以取少量做mix

我是先把各自单引物稀释到100uM,，然后再各取适量所有左右引物混合到一管中，配体系时就直接从单一管中移取。但是现在跑电泳都没条带，会不会是引物都聚集了啊
赞一下 回复此楼
3楼2013-12-09 23:15:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 文飞778899 at 2013-12-09 23:15:08
我是先把各自单引物稀释到100uM,，然后再各取适量所有左右引物混合到一管中，配体系时就直接从单一管中移取。但是现在跑电泳都没条带，会不会是引物都聚集了啊...

用的什么酶做的PCR，什么模板？
赞一下 回复此楼
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
4楼2013-12-09 23:36:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

文飞778899

银虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by gyesang at 2013-12-09 23:36:12
用的什么酶做的PCR，什么模板？...

Takara taq酶，真菌粗提DNA。我今天把100um的引物母液取2ul跑电泳，没有任何条带，难道引物有问题，十月份刚合成的啊
赞一下 回复此楼
5楼2013-12-10 14:25:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

引用回帖:
5楼: Originally posted by 文飞778899 at 2013-12-10 14:25:36
Takara taq酶，真菌粗提DNA。我今天把100um的引物母液取2ul跑电泳，没有任何条带，难道引物有问题，十月份刚合成的啊...

提取的基因组DNA是否有检测过？有没有用其他引物测试过？
赞一下 回复此楼
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
6楼2013-12-10 15:02:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

猫di阁楼

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
文飞778899: 金币+2, ★有帮助 2013-12-11 21:15:54
没有条带有很多种可能哦
引物最好还是不要先混装在一起，还有100UM的引物浓度是不是有点大啊？我们好像是用10UM的。
你使用混合的引物P没有条带么？有没有分开加试试看？
赞一下 回复此楼
7楼2013-12-10 21:06:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

文飞778899

银虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by gyesang at 2013-12-09 23:36:12
用的什么酶做的PCR，什么模板？...

模板是粗提真菌DNA，酶是takara taq酶。我想问下1.8kb片段，40个循环用什么酶效果比较好，谢谢
赞一下 回复此楼
8楼2013-12-11 21:20:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 文飞778899 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 考研调剂 +10 小sun要好运 2026-04-04 10/500 2026-04-04 23:14 by lqwchd
[考研] 323求调剂 +8 李佳乐1 2026-04-04 8/400 2026-04-04 22:26 by hemengdong
[考研] 086000生物与医药298调剂求助 +6 元元青青 2026-03-31 8/400 2026-04-04 22:15 by lys0704
[考研] 085404总分289，求调剂 +4 Acesczlo 2026-03-29 4/200 2026-04-04 21:43 by hemengdong
[考研] 277求调剂 +4 12A3 2026-04-02 5/250 2026-04-04 20:28 by 蓝云思雨
[考研] 材料383求调剂 +5 郭阳阳阳成 2026-04-04 5/250 2026-04-04 19:06 by dongzh2009
[考研] 081700化学工程与技术 一志愿中海洋 323 求调剂学校 +15 披星河 2026-04-03 15/750 2026-04-04 16:25 by dongzh2009
[考研] 293分求调剂，外语为俄语 +6 加一一九 2026-03-31 6/300 2026-04-04 14:57 by 聪明的大松鼠
[考研] 考研调剂 +8 不爱喝饮料 2026-04-03 8/400 2026-04-03 16:40 by Mistake-J
[考研] 材料340分调剂 +7 夏夜晚风_long 2026-04-02 9/450 2026-04-02 21:20 by dongzh2009
[考研] 一志愿北交大材料工程总分358 +8 cs0106 2026-04-01 9/450 2026-04-02 10:36 by 不吃魚的貓
[考研] 0710生物学，325求调剂 +3 mkkkkkl 2026-04-01 3/150 2026-04-02 09:48 by Jaylen.
[考研] 材料调剂 +12 一样YWY 2026-04-01 12/600 2026-04-02 09:15 by olim
[考研] 食品学硕362求调剂 +3 xuanxianxian 2026-04-01 3/150 2026-04-01 21:05 by 啊李999
[考研] 调剂 +3 好好读书。 2026-04-01 3/150 2026-04-01 17:06 by zhouyuwinner
[考研] 材料调剂 +10 Eujd1 2026-03-31 11/550 2026-04-01 11:23 by ivanqyq
[考研] 材料科学与工程求调剂 +13 深V宿舍吧 2026-03-29 13/650 2026-03-31 19:50 by Dyhoer
[考研] 085601 329分调剂 +6 yzsa12 2026-03-31 6/300 2026-03-31 15:23 by yanflower7133
[考研] 哈尔滨工业大学材料与化工专硕378求调剂 +3 塔比乌斯 2026-03-30 3/150 2026-03-30 22:55 by 无际的草原
[考研] 285求调剂 +6 AZMK 2026-03-29 9/450 2026-03-30 21:02 by dophin1985
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭