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zz122753617

铁杆木虫 (职业作家)

[求助] 用于转染的DNA/siRNA的一个小问题

请教下大牛,用于转染的DNA或者siRNA 是用的单链的还是双链的? 我想用单链做载基因,可行不?
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
zz122753617: 金币+20, ★★★很有帮助 2013-12-12 16:35:53
双链,不作死就不会死
2楼2013-12-07 13:07:15
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zz122753617

铁杆木虫 (职业作家)

引用回帖:
2楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2013-12-07 13:07:15
双链,不作死就不会死

那为啥单链不可以呢。对这方面着实不懂。。
3楼2013-12-10 10:03:28
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2013-12-12 16:39:48
引用回帖:
3楼: Originally posted by zz122753617 at 2013-12-10 10:03:28
那为啥单链不可以呢。对这方面着实不懂。。...

siRNA双链起作用,单链即使有效果也会弱很多。
在细胞里面转录体系是否识别单链DNA还是个问题,搞不好还被细胞清除掉。
4楼2013-12-10 12:54:09
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zz122753617

铁杆木虫 (职业作家)

引用回帖:
4楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2013-12-10 12:54:09
siRNA双链起作用,单链即使有效果也会弱很多。
在细胞里面转录体系是否识别单链DNA还是个问题,搞不好还被细胞清除掉。...

谢大神。还想问下为啥识别单链会是问题?单链和双链区别这么大么?
5楼2013-12-12 16:34:42
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gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

引用回帖:
5楼: Originally posted by zz122753617 at 2013-12-12 16:34:42
谢大神。还想问下为啥识别单链会是问题?单链和双链区别这么大么?...

建议仔细学习下RNA interference的相关知识,RNAi 2007年的诺贝尔奖,网上有很多综述可看,去下载一篇看看吧
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
6楼2013-12-12 16:43:03
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lcree

新虫 (初入文坛)

直接用试剂按说明书操作就行。我用过一款RFect小核酸转染试剂,操作很方便,不用特意添加或更换培养液,细胞死的也很少。实验结果不错。
7楼2018-09-26 13:29:58
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别踩我的菜

新虫 (小有名气)

用双链转染效果会好很多,但是也是可以选择试剂转染呢,一直听别人说的RFECT转染,在效果上还是可以的,这学期,我们也申请了试用装,具体效果啥的,要实验之后才能了解。
8楼2019-03-20 17:01:18
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宇宙小妖怪

铁虫 (小有名气)

建议双链,悬浮细胞会比普通的贴壁细胞难转一点,再加上有些转染试剂的毒性大,就导致了转染效率极低,稳转我们实验室没有做过,我们实验室就做过用BIODAI,SIRNA技术转染过A549细胞,楼主如果准备做稳转,先要构建病毒载体
9楼2019-06-12 09:40:08
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