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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 用于转染的DNA/siRNA的一个小问题
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zz122753617

铁杆木虫 (职业作家)

[求助] 用于转染的DNA/siRNA的一个小问题

请教下大牛，用于转染的DNA或者siRNA 是用的单链的还是双链的？ 我想用单链做载基因，可行不？
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1楼 2013-12-05 19:45:01
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
zz122753617: 金币+20, ★★★很有帮助 2013-12-12 16:35:53
双链，不作死就不会死
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2楼2013-12-07 13:07:15
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zz122753617

铁杆木虫 (职业作家)
引用回帖:
2楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2013-12-07 13:07:15
双链，不作死就不会死

那为啥单链不可以呢。对这方面着实不懂。。
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3楼2013-12-10 10:03:28
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)
★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-12-12 16:39:48
引用回帖:
3楼: Originally posted by zz122753617 at 2013-12-10 10:03:28
那为啥单链不可以呢。对这方面着实不懂。。...

siRNA双链起作用，单链即使有效果也会弱很多。
在细胞里面转录体系是否识别单链DNA还是个问题，搞不好还被细胞清除掉。
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4楼2013-12-10 12:54:09
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zz122753617

铁杆木虫 (职业作家)
引用回帖:
4楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2013-12-10 12:54:09
siRNA双链起作用，单链即使有效果也会弱很多。
在细胞里面转录体系是否识别单链DNA还是个问题，搞不好还被细胞清除掉。...

谢大神。还想问下为啥识别单链会是问题？单链和双链区别这么大么？
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5楼2013-12-12 16:34:42
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gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主
引用回帖:
5楼: Originally posted by zz122753617 at 2013-12-12 16:34:42
谢大神。还想问下为啥识别单链会是问题？单链和双链区别这么大么？...

建议仔细学习下RNA interference的相关知识，RNAi 2007年的诺贝尔奖，网上有很多综述可看，去下载一篇看看吧
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学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
6楼2013-12-12 16:43:03
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lcree

新虫 (初入文坛)
直接用试剂按说明书操作就行。我用过一款RFect小核酸转染试剂，操作很方便，不用特意添加或更换培养液，细胞死的也很少。实验结果不错。
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7楼2018-09-26 13:29:58
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别踩我的菜

新虫 (小有名气)
用双链转染效果会好很多，但是也是可以选择试剂转染呢，一直听别人说的RFECT转染，在效果上还是可以的，这学期，我们也申请了试用装，具体效果啥的，要实验之后才能了解。
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8楼2019-03-20 17:01:18
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宇宙小妖怪

铁虫 (小有名气)
建议双链，悬浮细胞会比普通的贴壁细胞难转一点，再加上有些转染试剂的毒性大，就导致了转染效率极低，稳转我们实验室没有做过，我们实验室就做过用BIODAI,SIRNA技术转染过A549细胞，楼主如果准备做稳转，先要构建病毒载体
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9楼2019-06-12 09:40:08
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