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兔儿宝

新虫 (初入文坛)

[求助] 中药体外细胞色素P450代谢试验

小妹现在在做体外代谢试验,用的使大鼠的肝微粒体,试验过程中遇到些问题:
1、若想知道是哪种P450酶对药物进行代谢的,怎么做,我查到的文献都是选择一个药物的浓度一个特异性抑制剂的浓度,测定药物的代谢产物的生成量。问题来了,我做的是中药中的几个成分,代谢产物还没有进行确证,能用产物的减少量来定量么?我看SCI几乎都是用产物的生成量表示的,用减少量能发外文么?还有就是药物的浓度只选择一个么?怎么样对浓度进行考察呢?
2、小妹还做了一部分的体外抑制实验,目的是看这几个成分对哪种酶有抑制作用,用的是特异性底物做的,方法学考察中,不加底物但是为了保证体积的一直,是加缓冲溶液还是提取的有机溶剂呢?
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哈蜜呱呱

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

1. 应该是测中药这几个成分原形药物的减少来确定吧,中药代谢产物很少有标准品,没法进行定量

2.这几个成分对哪些酶亚型有抑制作用,为何要用特异性底物做,不是应该用特异性抑制剂做吗?
   按我的理解,应该是加PBS缓冲液保持体积一致

我最近也在做这个,可以加个QQ联系下哟
世上万事,不过是一懒二拖三不读书。
2楼2013-12-11 10:46:56
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ailaozi

新虫 (初入文坛)

内容已删除
3楼2014-03-06 17:39:28
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兔儿宝

新虫 (初入文坛)

内容已删除
4楼2014-03-10 15:42:54
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冯桂芳

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 哈蜜呱呱 at 2013-12-11 10:46:56
1. 应该是测中药这几个成分原形药物的减少来确定吧,中药代谢产物很少有标准品,没法进行定量

2.这几个成分对哪些酶亚型有抑制作用,为何要用特异性底物做,不是应该用特异性抑制剂做吗?
   按我的理解,应该是 ...

请问,您的肝微粒体是自己提取的吗,可否交流经验,
5楼2016-03-23 14:18:20
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