24小时热门版块排行榜    

查看: 3424  |  回复: 27

lhf903

金虫 (正式写手)

引用回帖:
20楼: Originally posted by hospitals at 2013-12-03 10:12:16
请问一下,你有没有换新的样品,还是只是用原来的方法重新准备了模板?...

我做的是土壤微生物,是原来的土样,重新提取的DNA
21楼2013-12-03 12:36:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hospitals

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
21楼: Originally posted by lhf903 at 2013-12-03 12:36:23
我做的是土壤微生物,是原来的土样,重新提取的DNA...

我昨天重新做了一批PCR,还是以前的模板,药品也没换,竟然出来了大部分~~~
22楼2013-12-06 08:42:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lhf903

金虫 (正式写手)

引用回帖:
22楼: Originally posted by hospitals at 2013-12-06 08:42:58
我昨天重新做了一批PCR,还是以前的模板,药品也没换,竟然出来了大部分~~~...

PCR有时就是这样,祝你好运~
23楼2013-12-06 11:18:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xuchli

铜虫 (正式写手)

PCR有时候确实很莫明其妙
24楼2013-12-26 21:58:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

luwei13566

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-01-29 16:21:51
顺便问下,你检测的胶最下面的引物二聚体亮吗??如果很亮的话建议少加点引物,最好做个温度梯度PCR,来个+-10度的,每个梯度P一管看看。
你的模板只稀释处理过吗?你的体系里模板加多少??建议你不要稀释模板,反而应该加大模板的量。PCR的预变性时间稍微延长一些。
你PCR产物里有非特异性条带没,如果没有,退火时间、延伸时间都做延长处理。如果你的延伸时间原来2min,现在延长到4min,扩增循环到30,先不管杂带不杂带,先保证有带再说。~
大家相互帮助哈
25楼2013-12-27 00:10:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

achonghello

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

哈哈哈,跟我一样,之前我师兄还调侃说是不是要靠运气,但是每次换了新的模板,就可以啦。。。祝顺利!!!
26楼2013-12-27 09:57:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

nuliwangyu

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-01-29 16:22:01
引用回帖:
9楼: Originally posted by hospitals at 2013-12-01 21:52:37
对,模板是gDNA,先说一下PCR重复的问题就是之前能够成功扩增的,这应该能说明引物没有问题吧。现在同样的条件就是无法扩增,换过高保真酶,也无济于事。一开始考虑了模板降解问题,也重新提过DNA,都不行。
再就 ...

第一个问题:我觉得您的模板可能已经讲解掉了,或者溶解引物出现问题。您方便上传下电泳图片吗?之前的和现在的。
第二个问题:如果能去除掉认为操作的原因;有的能扩出来,说明有这个基因;有的扩不出来说明没有这个基因。
27楼2013-12-27 13:41:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

vivd娟

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

PCR真的很神奇,我只能这么说
28楼2015-08-06 14:43:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 hospitals 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 长年满屏的广告,版主太不责任了。基金也等的急 +4 gltch 2026-08-12 4/200 2026-08-12 16:08 by eulota
[基金申请] filecode +13 documentary 2026-08-10 15/750 2026-08-12 15:56 by 云上清扬
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +3 majunge000 2026-08-11 4/200 2026-08-11 20:13 by lch2012
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[硕博家园] 读博的好处 +3 lnee 2026-08-11 3/150 2026-08-11 18:10 by 希望我好好的
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 分享一下我之前已中青C的计划书的filecode +3 布布和一二 2026-08-11 4/200 2026-08-11 15:20 by aasahr
[基金申请] 我的国基提前知道中了,可是同事的操作让我实在接受不了,怎么会有这样的人 +8 家与远方 2026-08-10 13/650 2026-08-11 09:49 by 家与远方
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 关于代码变化问题,想知道的进来 +17 且听虎啸 2026-08-07 24/1200 2026-08-10 18:35 by zhangduo2008
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +9 布布和一二 2026-08-08 9/450 2026-08-10 11:22 by xxxx2020
[基金申请] 这样的filecode谁见过 +11 布布和一二 2026-08-08 22/1100 2026-08-10 11:10 by wmfsnow
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +5 yang182083 2026-08-06 7/350 2026-08-08 18:29 by zhanghaozhu
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变,有变的大神么? +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
[基金申请] 大家散了吧,后缀研究没有意义,别浪费时间了,过好目前的每一天,不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
[基金申请] filecode +14 等待解的谜 2026-08-06 19/950 2026-08-07 12:20 by wlwhappy
[基金申请] filecode +8 布布和一二 2026-08-06 11/550 2026-08-06 20:41 by tangpu318
信息提示
请填处理意见