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cedriclin

金虫 (小有名气)

[求助] 关于luciferase实验的质粒问题.

luciferase实验的常用载体,看文献有点混乱,有的写pGL3-luciferase.还有的写pGL3-TK-luciferase? 究竟哪个是对的?还有pGl3-basic质粒带不带TK?这个TK 到底是什么意思?
我知道海肾的质粒是pRL-TK 没有问题。麻烦各位虫友帮忙解答一下
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gyesang

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【答案】应助回帖

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cedriclin: 金币+10, ★★★很有帮助, 谢谢您 2013-11-29 10:36:41
你可以找到双荧光素酶报告系统的protocol仔细研究一下

总的原理是一个用firefly的基因作为报告基因,一个用renilla的luciferase基因作为内参照基因

你说的这个pGL3-luciferase,这个载体promega公司出品的,有四种可以选择,分别为 basic(含sv40 promoter 和SV40 enhancer),promoter(含sv40 promoter ), enhancer(含SV40 enhancer), control(什么都不含)

pGL3-TK-luciferase,意思是promoter是herpes simplex virus 的thymidine kinase promoter

海参 的pRL也有四种载体可以选择,分别为pRL-SV40,pRL-TK,pRL-CMV,pRL-null
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
2楼2013-11-28 20:02:52
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cedriclin

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by gyesang at 2013-11-28 20:02:52
你可以找到双荧光素酶报告系统的protocol仔细研究一下

总的原理是一个用firefly的基因作为报告基因,一个用renilla的luciferase基因作为内参照基因

你说的这个pGL3-luciferase,这个载体promega公司出品的,有 ...

您好,我还有个问题想咨询。
我如果想验证 一种药物对STAT3转录活性的影响。
使用的载体是 pGL3-STAT3-luci  和pRL-TK共转染,
而不是pGL3-STAT3-TK-luci 和pRL-TK共转染. 这样可以吗?
3楼2013-11-29 10:56:58
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