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Dionysius木虫 (小有名气)
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[求助]
做HPLC肽图分析时蛋白发生沉淀
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最近在做抗体的肽图分析,1mg/ml的抗体100 ul,首先用尿素(8M urea,100mM Tris-HCl,pH8.3)进行变性,再用DTT和IAA进行还原和烷基化。然后用10K的超滤管浓缩和透析,在离心的过程中还没有问题,但加入PBS后就立马发生了沉淀; 后面又用BSA试了一下,也是在这步发生了沉淀。 希望做过这方面实验的战友们能给我提供一些好的建议,感激不尽! |
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