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stickforver银虫 (小有名气)
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为什么pKD46一直没法转进BL21(DE3)菌种
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| 最近在做Red重组实验，想用Red重组系统敲除BL21(DE3)中的一个基因，可是实验中发现pKD46一直没法转进BL21(DE3）中，本人用过化转也用过电转均失败了。但同样的操作，本人将pKD46转到JM109（DE3）中却很容易。希望各位给帮忙分析分析为什么pKD46质粒就是转不进BL21(DE3)中。此外，本人发现BL21(DE3)基因组上位于T7RNA聚合酶基因附近有一个exo-bet-gam基因簇，因为pKD46一直转不进去，就想要是能诱导基因组上的exo-bet-gam基因簇表达也许也是能达到相同的效果，但是一直分析不出BL21(DE3)基因组上的exo-bet-gam基因簇受什么诱导。 |
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2楼2013-11-26 13:34:27
stickforver
银虫 (小有名气)
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3楼2013-11-27 14:59:31