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wangweijian

金虫 (小有名气)

[求助] chelex-100核酸裂解液提取线虫核酸

有谁用过chelex-100核酸裂解液快提线虫核酸的?我网上查了很多提线虫核酸的方法,基本上都有液氮冷冻这一步,目的是裂解细胞的作用,是否有种细胞裂解液或者其它能裂解线虫细胞的试剂来代替液氮冷冻呢?
  我现在用的chelex-100核酸裂解液成分是2%chelex-100,10uL 1M tirs-HCl,补足水至1mL。方法:单条线虫+40uL chelex 核酸裂解液+1uL 1mg/mL 蛋白酶K,95℃ 裂解10min,直接取上清作为PCR反应模板。
  结果:不稳定,有时能作出来,有时不能做出。
  我自己查的原因可能是线虫细胞没有完全裂解,因此想用一种功能强大的细胞裂解液,希望做过于此相关实验的同志们提供点技术支持。
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