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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 细胞污染问题
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1066479423

银虫 (小有名气)

[求助] 细胞污染问题

最近细胞总是污染，看着像是葡萄球菌，能不能再培养基里另外再加上抑制葡萄球菌的抗生素？？？？或者是平常有哪些需要注意的？？？
谢谢
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1楼 2013-11-23 21:26:56
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gyesang

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【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by 1066479423 at 2013-11-25 16:58:45
是串状的。我从网页上搜索的葡萄球菌的图片，看起来时一样的，污染就扔掉了，没有变成粉色，也没有闻是什么味道的。如果是酵母污染的话，怎么去除掉呢？谢谢...

酵母污染，有的人是往培养液里面加杀酵母的药，但是不彻底的，细胞污染了酵母，基本无解，只能扔了，重来
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9楼2013-11-25 20:30:56
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myprayer

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【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2013-11-24 21:46:48
加入双抗了吗？如果你觉得是菌污染的话，你可以做对照试验组。
一个培养瓶里面加双抗，一个不加，定期观察，有无黑点，细胞形态之类的。
还有弱弱的说一句
细胞污染原因千奇百怪，一下子要说明为什么污染，污染源是什么，还是不怎么容易的。要长期摸索。
1、细菌：细菌在普通倒置显微镜下为黑色细沙状，根据感染细菌的不同，可有不同的外形，培养液一般会浑浊变黄，对细胞生长影响明显。
仔细检查一下器皿的灭菌情况，是否在高压灭菌时放气时间足够，压力足够！尤其是和储存培养液接触的移液管等物品，连续两次污染的话有可能造成储存液污染，一定要注意！下次使用前检查一下培养液是否存在浑浊的现象！
可在培养液中加相应的抗生素处理
污染的可能原因：可能原因很多比如配液消毒问题、操作问题、环境问题等等
关于培养基的无菌状况，取培养基至培养瓶中（不加细胞），37度试培养一段时间后观察。如果没有细菌生长 就是操作的问题。
也可以在培养基中事先加入双抗（硫酸链霉素和氨苄青霉素）或者链霉素和青霉素这个看细胞类了。但双抗有时会影响细胞的状态，所以在做转染、检测细胞某项指标前一定要撤去双抗，以避免影响实验结果。
一些小的tips：
培养基重要性不说，你的操作，净化间的环境，培养箱的水，紫外线，以及洗消过程中的任何一个环节。。。
平时养成好习惯。
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2楼2013-11-24 12:40:04
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1066479423

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by myprayer at 2013-11-24 12:40:04
加入双抗了吗？如果你觉得是菌污染的话，你可以做对照试验组。
一个培养瓶里面加双抗，一个不加，定期观察，有无黑点，细胞形态之类的。
还有弱弱的说一句
细胞污染原因千奇百怪，一下子要说明为什么污染，污染源 ...

你好，谢谢。培养基是加双抗的，以前刚养细胞的时候都没有污染过，现在养的多了，污染的更经常了。现在是要么是复苏室污染，要么是换液后污染。现在在两个细胞房同时养细胞，在另外一个养细胞不加抗生素都没有事情。我想应该是细胞的原因，现在想要问一下，有没有对葡萄球菌有特效并且可以加到细胞培养的抗生素？
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3楼2013-11-24 20:53:00
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gyesang

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【答案】应助回帖

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kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2013-11-24 21:46:53
你能确定是葡萄球菌，不知道你的污染是什么样子的，不知道菌长的是不是像葡萄串一样的，如果是的话，我估计是酵母污染了，培养液会变成粉色，然后还有一股酒精味，酵母污染的话，就只能重新复苏细胞了
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学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
4楼2013-11-24 21:11:04
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