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1066479423

银虫 (小有名气)

[求助] 细胞污染问题

最近细胞总是污染,看着像是葡萄球菌,能不能再培养基里另外再加上抑制葡萄球菌的抗生素????或者是平常有哪些需要注意的???
谢谢
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gyesang

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【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by 1066479423 at 2013-11-25 16:58:45
是串状的。我从网页上搜索的葡萄球菌的图片,看起来时一样的,污染就扔掉了,没有变成粉色,也没有闻是什么味道的。如果是酵母污染的话,怎么去除掉呢?谢谢...

酵母污染,有的人是往培养液里面加杀酵母的药,但是不彻底的,细胞污染了酵母,基本无解,只能扔了,重来
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
9楼2013-11-25 20:30:56
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myprayer

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【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2013-11-24 21:46:48
加入双抗了吗?如果你觉得是菌污染的话,你可以做对照试验组。
一个培养瓶里面加双抗,一个不加,定期观察,有无黑点,细胞形态之类的。
还有弱弱的说一句
细胞污染原因千奇百怪,一下子要说明为什么污染,污染源是什么,还是不怎么容易的。要长期摸索。
1、细菌:细菌在普通倒置显微镜下为黑色细沙状,根据感染细菌的不同,可有不同的外形,培养液一般会浑浊变黄,对细胞生长影响明显。
仔细检查一下器皿的灭菌情况,是否在高压灭菌时放气时间足够,压力足够!尤其是和储存培养液接触的移液管等物品,连续两次污染的话有可能造成储存液污染,一定要注意!下次使用前检查一下培养液是否存在浑浊的现象!
可在培养液中加相应的抗生素处理
污染的可能原因:可能原因很多比如配液消毒问题、操作问题、环境问题等等
关于培养基的无菌状况,取培养基至培养瓶中(不加细胞),37度试培养一段时间后观察。如果没有细菌生长 就是操作的问题。
也可以在培养基中事先加入双抗(硫酸链霉素和氨苄青霉素)或者链霉素和青霉素这个看细胞类了。但双抗有时会影响细胞的状态,所以在做转染、检测细胞某项指标前一定要撤去双抗,以避免影响实验结果。
一些小的tips:
培养基重要性不说,你的操作,净化间的环境,培养箱的水,紫外线,以及洗消过程中的任何一个环节。。。
平时养成好习惯。
2楼2013-11-24 12:40:04
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1066479423

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by myprayer at 2013-11-24 12:40:04
加入双抗了吗?如果你觉得是菌污染的话,你可以做对照试验组。
一个培养瓶里面加双抗,一个不加,定期观察,有无黑点,细胞形态之类的。
还有弱弱的说一句
细胞污染原因千奇百怪,一下子要说明为什么污染,污染源 ...

你好,谢谢。培养基是加双抗的,以前刚养细胞的时候都没有污染过,现在养的多了,污染的更经常了。现在是要么是复苏室污染,要么是换液后污染。现在在两个细胞房同时养细胞,在另外一个养细胞不加抗生素都没有事情。我想应该是细胞的原因,现在想要问一下,有没有对葡萄球菌有特效并且可以加到细胞培养的抗生素?
3楼2013-11-24 20:53:00
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gyesang

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【答案】应助回帖

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感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2013-11-24 21:46:53
你能确定是葡萄球菌,不知道你的污染是什么样子的,不知道菌长的是不是像葡萄串一样的,如果是的话,我估计是酵母污染了,培养液会变成粉色,然后还有一股酒精味,酵母污染的话,就只能重新复苏细胞了
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
4楼2013-11-24 21:11:04
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