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1066479423银虫 (小有名气)
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[求助]
细胞污染问题
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最近细胞总是污染，看着像是葡萄球菌，能不能再培养基里另外再加上抑制葡萄球菌的抗生素？？？？或者是平常有哪些需要注意的？？？ 谢谢 |
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4楼2013-11-24 21:11:04
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kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2013-11-24 21:46:48
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加入双抗了吗？如果你觉得是菌污染的话，你可以做对照试验组。 一个培养瓶里面加双抗，一个不加，定期观察，有无黑点，细胞形态之类的。 还有弱弱的说一句 细胞污染原因千奇百怪，一下子要说明为什么污染，污染源是什么，还是不怎么容易的。要长期摸索。 1、细菌：细菌在普通倒置显微镜下为黑色细沙状，根据感染细菌的不同，可有不同的外形，培养液一般会浑浊变黄，对细胞生长影响明显。 仔细检查一下器皿的灭菌情况，是否在高压灭菌时放气时间足够，压力足够！尤其是和储存培养液接触的移液管等物品，连续两次污染的话有可能造成储存液污染，一定要注意！下次使用前检查一下培养液是否存在浑浊的现象！ 可在培养液中加相应的抗生素处理 污染的可能原因：可能原因很多比如配液消毒问题、操作问题、环境问题等等 关于培养基的无菌状况，取培养基至培养瓶中（不加细胞），37度试培养一段时间后观察。如果没有细菌生长 就是操作的问题。 也可以在培养基中事先加入双抗（硫酸链霉素和氨苄青霉素）或者链霉素和青霉素这个看细胞类了。但双抗有时会影响细胞的状态，所以在做转染、检测细胞某项指标前一定要撤去双抗，以避免影响实验结果。 一些小的tips： 培养基重要性不说，你的操作，净化间的环境，培养箱的水，紫外线，以及洗消过程中的任何一个环节。。。 平时养成好习惯。 |
2楼2013-11-24 12:40:04
1066479423
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