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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 米氏常数的计算过程中的误差问题
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amq7392

铁杆木虫 (著名写手)

[求助] 米氏常数的计算过程中的误差问题 已有1人参与

在酶的动力学参数Km和Vmax测定过程中，需要在一系列不同的底物浓度下测得反应初速率，然后对底物浓度S和反应速率V进行双倒数作图（在excel中进行线性拟合）。问题是：我在每个底物浓度下，都重复测定了三次反应速率，用来进行双倒数作图的v是平均值，那么我最后如何计算Km和Vmax误差值？
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1楼 2013-11-23 15:33:55
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amq7392

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2013-11-26 01:05:16
连酶都是不同批次纯化的，何况溶液。那篇文章我用kinetic搜索了一下，没发现在哪里讲了怎么做的，怪了。你看过的SCI文章中，带误差的多还是不带的多？...

不带误差的居多吧。那篇文章没有具体讲它的误差是怎么得出来的。一般的实验数据误差好计算，直接求3次数据的标准差就可以了。但是像Km和Vmax这种，是需要经过线性拟合后间接得出的，真是不清楚它的误差是怎么算的。
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6楼2013-11-26 10:59:03
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远志小草

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
amq7392: 金币+2, ★有帮助 2013-11-26 11:00:02
分别作图算出Vm和Km,然后求误差，

[ 发自小木虫客户端 ]
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2楼2013-11-24 10:38:02
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冼亮淀粉酶

专家顾问 (知名作家)

生物大分子降解酶

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
amq7392: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-11-26 10:59:38
这个问题我没有注意过，我是像你那样每次实验都相同的反应设平行取均值，计算Vm和Km。但是做了2次，如果2次都是差不多的Vm和Km，就相信这个酶就差不多是这样了，再从这2组中选取一组作为取信，另一组作为印证。如果两次测得的结果相差太远，则做第三次作为终判。误差的问题我从来都没有注意过，你看SCI文章中相关数据有没有出现误差的？把这些文章发上来，我学习一下。
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流星来时我许了个愿，愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具，久不看论坛一来就提问者，宁弃EPI和VIP也不回帖。
3楼2013-11-25 19:04:06
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amq7392

铁杆木虫 (著名写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 冼亮淀粉酶 at 2013-11-25 19:04:06
这个问题我没有注意过，我是像你那样每次实验都相同的反应设平行取均值，计算Vm和Km。但是做了2次，如果2次都是差不多的Vm和Km，就相信这个酶就差不多是这样了，再从这2组中选取一组作为取信，另一组作为印证。如果 ...

有些sci文章中Km和Vmax是带有误差值的，有些没有。比如下面这篇文章中的动力学参数都带误差值：http://link.springer.com/article/10.1007/s00253-011-3568-9
再追问一下，你所说的【每次实验都相同的反应设平行取均值，计算Vm和Km。但是做了2次】，你做的2次重复，是每次都要重新配制一系列不同浓度的底物溶液，分别测定Vm和Km，还是只配一次底物溶液，然后测两次？
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4楼2013-11-25 21:21:37
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