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gswangfm

铁虫 (小有名气)

[求助] 层析柱的问题

请问大家一个柱子洗脱剂的问题,当提取物过柱子之后要有洗脱剂洗脱,这时我只需要极性较大的哪种物质,我能不能直接用极性较大的洗脱机洗脱?他会不会吧极性小的物质也洗脱下来?还是必须先把弱极性一步一步的洗脱完才能洗脱大极性的呢?洗脱的原理是怎么样的呢?
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alaqi

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

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gswangfm(zybpxy代发): 金币+2 2013-12-10 20:28:30
洗脱的原理就是吸附—解脱、吸附—解脱,作为固定相——以柱层析硅胶为例,会对要分离的物质进行吸附,在吸附过程中由于待分离的物质在硅胶的吸附强度不同,会出现差异,像人们跑步一样有人跑的快,有人跑的慢,刚开始可能没有区别,但是时间一常就出现差别了。
   要分离好混合物,首先应试验混合物中的极性,可以先用TLC——薄层层析进行判断,找出合适的解脱剂——流动相。
   在柱层析洗脱的过程中,如果要分离的化合物的Rf值较大——也就是说化合物较好分离,或者待分离的化合物的极性较小的物质,可能仅需要极性较小的解脱剂就能够洗脱出待分离的化合物,如果Rf较小,可能需要进行梯度洗脱,且层析柱要足够长才能够分离好,可以从网上查一下。
2楼2013-11-17 21:46:13
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gswangfm

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by alaqi at 2013-11-17 21:46:13
洗脱的原理就是吸附—解脱、吸附—解脱,作为固定相——以柱层析硅胶为例,会对要分离的物质进行吸附,在吸附过程中由于待分离的物质在硅胶的吸附强度不同,会出现差异,像人们跑步一样有人跑的快,有人跑的慢,刚开 ...

我可不可以直接用极性大的洗脱剂洗脱柱子,会不会吧极性小的物质也冲下来?
3楼2013-11-18 11:08:01
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zhoupeng87

版主 (文学泰斗)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

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gswangfm(zybpxy代发): 金币+2 2013-12-10 20:28:25
如果配好洗脱机的话可以的,就是根据相似相容的来洗,你可以按照上面说的先点板子试一下
4楼2013-11-18 11:41:04
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alaqi

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★
gswangfm(zybpxy代发): 金币+2 2013-12-10 20:28:40
引用回帖:
3楼: Originally posted by gswangfm at 2013-11-18 11:08:01
我可不可以直接用极性大的洗脱剂洗脱柱子,会不会吧极性小的物质也冲下来?...

你这样做,就等于跑步的人齐步跑了
5楼2013-11-18 17:01:57
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gswangfm

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by alaqi at 2013-11-18 17:01:57
你这样做,就等于跑步的人齐步跑了...

再请教一个问题,如果我把极性小的已经洗脱了,现在洗极性大的,是不是只要加大洗脱剂的量就可以确保他完全洗脱下来了?
6楼2013-11-18 20:05:33
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xnnd2008

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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gswangfm(zybpxy代发): 金币+2 2013-12-10 20:28:46
用的什么填料,什么洗脱剂,然后再确定怎么洗脱
7楼2013-11-19 15:53:24
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gswangfm

铁虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by xnnd2008 at 2013-11-19 15:53:24
用的什么填料,什么洗脱剂,然后再确定怎么洗脱

填料和洗脱剂都是参考文献的。但是我现在就是不知道能不能洗脱完全,还有就是我要的物质会不会因为过柱子不妥而有损失。
8楼2013-11-19 16:55:37
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老翁16

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
gswangfm(zybpxy代发): 金币+2 2013-12-10 20:28:16
先跑板控制Rf=0.2-0.3之间,然后用比这极性稍小的把前面的不要东西冲掉,大概2-3个柱体积,然后加入你选定好的洗脱剂冲。这样洗脱下来就是你想要的那个点的东西啦
用心做好每一件事
9楼2013-12-05 08:59:15
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