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cjjking

新虫 (初入文坛)

[求助] 5-羟甲基糠醛的液相色谱分析很奇怪的现象求教原因

我做实验做出来的主要产物是5-羟甲基糠醛,它的紫外最大吸收波长在284或者283nm左右,做液相色谱分析时,用的外标法先做出它的标准浓度曲线,使用标样时出峰,和峰面积都很正常,但是我用做的产物打液相时,峰也出峰,但是峰面积小的可怜,算出来都是负的了,一次偶然的机会,使用216nm作为紫外波长是时,峰面积很理想,和标样不相上下,想请教这是为什么呢?为什么一般论文都是采用最大吸收波长为检测波长,原理是什么呢?如果我不使用最大吸收波长作为检测波长有为题吗?好纠结啊
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deng_jin

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
suruiqin: 金币+2, 感谢您的交流,辛苦了,欢迎常来分析版~ 2013-11-19 10:38:21
cjjking: 金币+5, ★★★很有帮助 2013-12-15 20:46:15
首先你这样做肯定是不行的!
选取最大吸收波长作为检测波长是因为这样干扰最小。
其次,你说“使用216nm作为紫外波长是时,峰面积很理想,和标样不相上下”这是什么意思?是不是在216nm时,样品的峰面积和标准品在216nm波长下的检测面积相似,还是与标准品在284nm波长下的检测面积相似?两者的保留时间可否一致啊?
最后,帮你分析原因。你用的检测器是UV还是DAD?如果是DAD,你看下你的样品最大吸收波长是多少?你能否透露你的实验条件,估计你的样品中HMF很少。
2楼2013-11-19 00:53:25
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cjjking

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by deng_jin at 2013-11-19 00:53:25
首先你这样做肯定是不行的!
选取最大吸收波长作为检测波长是因为这样干扰最小。
其次,你说“使用216nm作为紫外波长是时,峰面积很理想,和标样不相上下”这是什么意思?是不是在216nm时,样品的峰面积和标准品在 ...

我用的检测器是UV的,保留时间也是一致的,我去做了紫外,发现它在222nm处也有一个吸收峰,但是没有284nm处的大,就是我用284nm作为紫外波长时,打出来的峰不但小而且峰中间该出峰的时候出现了负的吸收峰,我用的是乙醇溶液打了乙醇溶液后发现乙醇溶液打出的峰就是那样的,估计是在那台机子上有遮蔽,你觉得对吗?我找到一篇文献也是用222nm做的,可是为什么有的文献上用283 nm做也是乙醇作为溶剂,他也打的出来的,想请问你问什么呢?
3楼2013-12-15 20:43:45
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cjjking

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by deng_jin at 2013-11-19 00:53:25
首先你这样做肯定是不行的!
选取最大吸收波长作为检测波长是因为这样干扰最小。
其次,你说“使用216nm作为紫外波长是时,峰面积很理想,和标样不相上下”这是什么意思?是不是在216nm时,样品的峰面积和标准品在 ...

我用222nm做的时候峰形和标样是一致的
4楼2013-12-15 20:45:59
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张弘毅

银虫 (小有名气)

估计纯度不够,或者浓度不够。
5楼2014-07-22 20:23:25
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天空shm

铁虫 (小有名气)

我也在做5-HMF,想问一下楼主在284测时峰小的原因是否是因为溶剂峰太高,所以看起来样品的峰很小?我用的是农业部的方法处理的,出现了和你一样的问题,我的是用甲醇定容的,甲醇含量太高,所以样品峰小的可怜,希望能探讨一下啊
6楼2014-12-04 11:43:50
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