应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 含sacB基因的大肠杆菌在不含Nacl 含15%蔗糖的LB上生长，不知道是什么原因？
131/2返回列表12下一页
查看: 3294  |  回复: 12
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

l刘莉娜

新虫 (小有名气)

[交流] 含sacB基因的大肠杆菌在不含Nacl 含15%蔗糖的LB上生长，不知道是什么原因？ 已有7人参与

含sacB基因的大肠杆菌在不含Nacl 含15%蔗糖的LB上生长，不知道是什么原因？


此菌株在相同条件下的液体LB（不含Nacl 含15%蔗糖）是不生长的，但是拿这个菌做感受态后铺在不含Nacl 含15%蔗糖的LB平板上菌还是生长，理论上讲是不应该有菌落的。我重复了几次结果都是一样的，请知道的虫友帮忙解释一下，非常感谢！
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

双交换

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-11-14 15:59:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
做感受态时染菌了？？？？
赞一下 回复此楼
Thank-you，so-blue.
2楼2013-11-14 16:15:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

l刘莉娜

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by susizheng at 2013-11-14 16:15:23
做感受态时染菌了？？？？

应该没有，我重复了好几遍，我在想是不是我克隆时sacB的调控区域没有全部克隆，导致SacB的表达较弱，使菌在平板上还能生长
赞一下 回复此楼
3楼2013-11-14 18:28:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liygmail

至尊木虫 (职业作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by l刘莉娜 at 2013-11-14 18:28:02
应该没有，我重复了好几遍，我在想是不是我克隆时sacB的调控区域没有全部克隆，导致SacB的表达较弱，使菌在平板上还能生长...

很可能克隆时sacB基因突变而表达蛋白失活
赞一下 回复此楼
4楼2013-11-14 21:31:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

l刘莉娜

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by liygmail at 2013-11-14 21:31:15
很可能克隆时sacB基因突变而表达蛋白失活...

但是在液体LB 含10%蔗糖是不长的。我克隆的时候没有连表达载体，是用SacB自身的启动子。
赞一下 回复此楼
5楼2013-11-15 13:22:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yyy_zzz

木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
不知道LZ 用到哪一个sacB，有的sacB自身启动子在E.coli中是有作用的。至于你说到的情况，考虑是sacB基因的失活。液体中不长，可能是没有到你能看到的程度，平板上只要有突变，你就能看到。如果，你感受态做出来以后，蔗糖平板，长大不是很多的话，可以用，只是有点增加后续工作量。如果长满了平板，你需要再纯化你的原始菌株，取单菌落检测后再做感受态。个人见解，仅供参考。
赞一下 回复此楼
6楼2013-11-16 19:05:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

l刘莉娜

新虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by yyy_zzz at 2013-11-16 19:05:50
不知道LZ 用到哪一个sacB，有的sacB自身启动子在E.coli中是有作用的。至于你说到的情况，考虑是sacB基因的失活。液体中不长，可能是没有到你能看到的程度，平板上只要有突变，你就能看到。如果，你感受态做出来以后 ...

谢谢，我用的SacB是从枯草里pcR出来的，但是它的上游sacR（500bp）我只p出来了一半,怀疑是不是这个原因，导致其启动较弱。
赞一下 回复此楼
7楼2013-11-17 09:41:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yyy_zzz

木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
7楼: Originally posted by l刘莉娜 at 2013-11-17 09:41:53
谢谢，我用的SacB是从枯草里pcR出来的，但是它的上游sacR（500bp）我只p出来了一半,怀疑是不是这个原因，导致其启动较弱。...

好象是，我隐约记得sacB之前有一个衰减子还是什么的，再之前是启动子。可能跟你扩增的太短也有关系。但是，液体不能生长平板能生长也奇怪。建议你做一个不加蔗糖的平板和加了蔗糖的平板，两者一对照，你就知道你的sacB基因到底怎么样了。
赞一下 回复此楼
8楼2013-11-17 18:08:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zdty

铁杆木虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你好，我最近也在做蔗糖筛选，请问含15%蔗糖的LB里面一定要不加Nacl吗，为什么
赞一下 回复此楼
9楼2014-07-16 07:59:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jinying1123

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
9楼: Originally posted by zdty at 2014-07-16 07:59:52
你好，我最近也在做蔗糖筛选，请问含15%蔗糖的LB里面一定要不加Nacl吗，为什么

我也有这样的疑问，为什么不能加NaCl，那在配制LB时候还是按原来的比例加yeast extract和 tryptone么？
赞一下 回复此楼
10楼2014-09-11 11:34:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 l刘莉娜 的主题更新
131/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭