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l刘莉娜

新虫 (小有名气)

[交流] 含sacB基因的大肠杆菌在不含Nacl 含15%蔗糖的LB上生长,不知道是什么原因? 已有7人参与

含sacB基因的大肠杆菌在不含Nacl 含15%蔗糖的LB上生长,不知道是什么原因?


此菌株在相同条件下的液体LB(不含Nacl 含15%蔗糖)是不生长的,但是拿这个菌做感受态后铺在不含Nacl 含15%蔗糖的LB平板上菌还是生长,理论上讲是不应该有菌落的。我重复了几次结果都是一样的,请知道的虫友帮忙解释一下,非常感谢!
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l刘莉娜

新虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by yyy_zzz at 2013-11-16 19:05:50
不知道LZ 用到哪一个sacB,有的sacB自身启动子在E.coli中是有作用的。至于你说到的情况,考虑是sacB基因的失活。液体中不长,可能是没有到你能看到的程度,平板上只要有突变,你就能看到。如果,你感受态做出来以后 ...

谢谢,我用的SacB是从枯草里pcR出来的,但是它的上游sacR(500bp)我只p出来了一半,怀疑是不是这个原因,导致其启动较弱。
7楼2013-11-17 09:41:53
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susizheng

木虫 (著名写手)

我們是糖 甜到憂傷

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
做感受态时染菌了????
Thank-you,so-blue.
2楼2013-11-14 16:15:23
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l刘莉娜

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by susizheng at 2013-11-14 16:15:23
做感受态时染菌了????

应该没有,我重复了好几遍,我在想是不是我克隆时sacB的调控区域没有全部克隆,导致SacB的表达较弱,使菌在平板上还能生长
3楼2013-11-14 18:28:02
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liygmail

至尊木虫 (职业作家)

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
3楼: Originally posted by l刘莉娜 at 2013-11-14 18:28:02
应该没有,我重复了好几遍,我在想是不是我克隆时sacB的调控区域没有全部克隆,导致SacB的表达较弱,使菌在平板上还能生长...

很可能克隆时sacB基因突变而表达蛋白失活
4楼2013-11-14 21:31:15
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