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hujing113

铜虫 (初入文坛)

[求助] 如何用紫外分光光度计来确定细菌的浓度?怎么做标准曲线?

各位大侠,我的专业不是生物学,但现在因为课题的需要,想知道怎么做细菌的标准曲线图来确定细菌的含量。
我合成了一种抗菌物质,并把这种物质处理到布上,把处理后的布样放在有细菌的培养液中,经过一段时间的培养,
想知道这时的培养液中的细菌含量与未加布样的对照组的细菌含量(菌落数)。 我知道可以用平板法来做,可是这个工作量太大,
而且我的专业知识不行。能不能用标准曲线的方法来做?要怎么操作呢?我用的菌种是金黄葡萄球菌和大肠杆菌。
最好能给普及一下基础知识。
各位大侠,跪求帮助啊,不胜感激!!!谢谢!
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努力,加油!
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eagles123

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

那就要看抑菌剂的效果了。OD的灵敏度很低。如果我记得不错 10*6 CFU/ml 浓度OD都测不出来。 所以如果你抑菌剂比较强你得到的结果就可能是一条平线,但实际上可能是在死或者长得很慢,长到很低的水平就不长了,这些都OD都反映不出来。  另外OD也不能反映这种情况下细菌的生长过程, 比如数量先减少 再增加, 或者先增加到后期再减少。
6楼2013-11-14 21:14:07
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dllchina

木虫 (著名写手)

有机的微生物大神

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
hujing113: 金币+10, 有帮助 2013-11-14 20:55:31
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励应助! 2013-11-14 21:35:59
微生物OD值是反映菌体生长状态的一个指标,OD是optical delnsity(光密度)的缩写,表示被检测物吸收掉的光密度。通常400~700nm 都是微生物测定的范围,需要紫外分光光度计测最大吸收波长。你是什么菌种?用得最多的就是505nm测菌丝菌体、560nm测酵母、600nm测细菌。 用测OD方法画微生物生长曲线时,同一株菌的起始培养浓度可以准备多管(根据检测点的需要,如需检测10个点,就准备10管),然后每个点取一管出来测OD值就行了。

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2楼2013-11-14 17:12:07
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eagles123

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
hujing113: 金币+5, 有帮助 2013-11-14 21:02:29
laozuzunzhe: 金币+1, 鼓励应助! 2013-11-14 21:36:09
OD只能用来做生长 你要做抑菌 是不能用OD的。 细菌死了 但是细胞还在那。 只能用平板来做。
3楼2013-11-14 20:53:43
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hujing113

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by dllchina at 2013-11-14 17:12:07
微生物OD值是反映菌体生长状态的一个指标,OD是optical delnsity(光密度)的缩写,表示被检测物吸收掉的光密度。通常400~700nm 都是微生物测定的范围,需要紫外分光光度计测最大吸收波长。你是什么菌种?用得最多 ...

谢谢您的帮助!我用的是金黄葡萄球菌和大肠杆菌,应该是600nm。 您能不能具体地给说一下那个曲线的做法 过程 还有起始培养浓度大概取多少合适啊?如果能有相应的步骤那就更好了! 因为实在是外行,就是这些小问题,也搞不清楚。谢谢您!期待您的回复!
努力,加油!
4楼2013-11-14 20:54:56
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