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王玮玮_fly

铁虫 (初入文坛)

[求助] 用发酵罐发酵酿酒酵母生产GSH 已有2人参与

各位大侠,我用10L发酵罐使用酿酒酵母生产谷胱甘肽,没有控制溶氧、pH,定时取样检测,发现没有GSH的产生,怀疑是产生了GSH,已被氧化或是被菌体利用,且发酵过程中,发酵时间4-5天,接种量大约0.5%,pH先下降后上升至8.9,DO值先是100%后下降又上升至100%,所接样菌体形态是渣状,下一步不知道怎样,希望大家给点建议。
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阿月浑子V5

至尊木虫 (著名写手)

这几天正用的这个GSH呢,用量较少,难称死了。
伤痕,是男人的勋章。
2楼2013-11-11 17:53:06
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wt29088

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
王玮玮_fly: 金币+10, ★★★很有帮助 2013-11-12 16:24:17
个人没做过酿酒酵母,但是见过别人做过。结合发酵的一些经验。
1、初期DO 100%是正常的,但是应该接种后几个小时内就有明显的下降趋势。这个按菌种不同而不同,大肠杆菌很快就能看到效果。酿酒酵母可能下降的趋势慢一点。
2、一般来讲初期pH下降是由于糖类物质的消耗,导致pH下降。后期可能是糖类物质消耗完毕,分解蛋白胨 酵母粉之类的有机氮源使pH上升。
3、你不控制pH和补料,很可能酿酒酵母会产生乙醇,导致你的菌种中毒。
4、pH假如不在酿酒酵母生长范围之内,酵母可能死掉或者活性不好。
5、营养物质消耗光了,酵母会自溶。即使酵母没有死亡,营养物质消耗光了,DO肯定是要上升的。

你都有发酵罐了,怎么不会控制pH和DO呢,随便找找文献看,都是有相关文献的。还有补料这一块你也没做。
还有GSH的前体物质,比如半胱氨酸什么的你也没添加。
记忆中江南大学有发过一篇文章,忘了什么名字了,就是做酿酒酵母发酵生产GSH的优化等的。
可能发表在AEM上或者 BT上还是AMB,当时只是看过文章,但是现在忘掉了。
3楼2013-11-12 16:12:30
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lgying22

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
个人觉得你介绍得也不够清楚,你能够测GSH吗
4楼2013-11-12 21:50:54
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王玮玮_fly

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by lgying22 at 2013-11-12 21:50:54
个人觉得你介绍得也不够清楚,你能够测GSH吗

可以通过HPLC来测定GSH的含量
5楼2013-11-13 10:37:25
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superfido

新虫 (初入文坛)

根据你的叙述 应该是你的溶氧电极有问题 接种后溶氧不可能维持在100% 建议你先校正下溶氧电极 再试试
6楼2013-11-14 14:51:22
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FTD顺

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

你这情况很可能是根本没有GSH的产生。
接种量可以稍微加大一点,这个问题不大,温度和ph还有溶氧是必要控制的,不知道你的培养基成分是不是合适。发酵过程中还需要补充碳源(糖或者甘油)和前体(半胱氨酸和甘氨酸),并需要控制其浓度。你得根据溶氧变化来推断你的菌体生长状态,做出相应操作;并维持合适的溶氧。
你的发酵终点的判断还不明确,你先选定一个测gsh的方法好了(化学法或者HPLC法都可以)
感觉你才开始做发酵,你需要先查些相关知识再继续。
7楼2013-12-24 12:13:31
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zhangxingc

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

接种量可能有点小
发酵中间显示变化,至少应该在这些变化点取样,检测酵母和代谢产物的含量
IwanttoaccompanyyoumorethanyouknowbutIcann't
8楼2013-12-27 09:30:28
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420221887

新虫 (初入文坛)

溶氧和pH肯定是要控制的,还有需要加前体,才能提高含量
9楼2017-03-13 11:00:17
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