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刘洪存

金虫 (小有名气)

[求助] 微生物此生代谢产物研究相关问题

问题一,微生物此生代谢产物的研究中,为什么很多文献中只用了乙酸乙酯的萃取物,而不像植物中的天然产物那样分阶萃取呢?
问题二,对于初期次生代谢产物的种类的研究,在不同培养基中,同一菌株的代谢产物不同,种类、数量均有变化,怎么来断定代谢产物大约的种类数目?HPLC+TLC吗?TLC是用什么仪器检测的?
问题三,研究中,有很多菌株可以选择,在选择研究的菌株时,是以此生代谢产物的的种类作为参考还是以代谢产物的活性作为参考?or活性作引导,种类作主要参考?如果是这样,求大神分享一下经验,即实战时,是如何参考的,谢谢!
小弟一人作这个研究,学校有史以来头一个,无从下手,求指导,跪谢!!
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czfscf

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
xiaoxiao270: 金币+1, 谢谢交流 2013-11-05 17:52:06
1、由于乙酸乙酯本身的易挥发性等特点,所以作萃取剂比较合适;更重要的是它萃取的是中低极性的物质部分,这部分前人研究的比较多,容易出成绩,所以很多人都做这个,当然也有人用二氯甲烷及高极性部分的正丁醇萃取。
2、如果想大致了解下某个菌的代谢物质,可以拿发酵液粗提物上个GC-ms,用ms的质谱库可以匹配一些常见的物质,如脂肪酸等;
3、这个应该根据自己的实验目的来吧,如果是想要做药做物质的,可做活性先,如果是做发酵什么的,可以从菌着手。当然还可以通过宏基因筛选法筛选含目的基因(如某种抗生素)的菌株。
Ecological Genomics;the scientific walking hormone
2楼2013-11-05 12:25:37
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刘洪存

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by czfscf at 2013-11-05 12:25:37
1、由于乙酸乙酯本身的易挥发性等特点,所以作萃取剂比较合适;更重要的是它萃取的是中低极性的物质部分,这部分前人研究的比较多,容易出成绩,所以很多人都做这个,当然也有人用二氯甲烷及高极性部分的正丁醇萃取 ...

1.我觉得单用乙酸乙酯萃取,萃取不完,在水相中还有蛮多物质的,所以就想用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇分阶段萃取,有必要吗?在分阶段萃取的时候,用氯仿萃取3或5次,再用乙酸乙酯萃取,问题出现了。首先是在乙酸乙酯层仍旧含有氯仿层的物质,那如何保证氯仿萃取的时候物质都萃取完全了呢?如果氯仿层萃取的时候物质有残留,那过柱的时候,工作量就无形中增加了。这个问题有很好的解决办法吗?或者说有什么比较简洁的办法可以判断氯仿层已经萃取干净了?其次,用氯仿萃取完成后,再加入乙酸乙酯萃取,出现了很严重的乳化现象,是为什么呢?有什么解决办法么?
2.关于GC-MS,适用于所有物质吗?如果物质不容易气化可以做吗呢?没做过气相,目前知识面仅限于书本知识,望见谅~~我同学说他们学校用液质联用,我们学校只有气质~~~
3.我们是朝着做药去的,就是为了得到新化合物,当然有活性才好~
3楼2013-11-05 16:16:47
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czfscf

金虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 刘洪存 at 2013-11-05 16:16:47
1.我觉得单用乙酸乙酯萃取,萃取不完,在水相中还有蛮多物质的,所以就想用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇分阶段萃取,有必要吗?在分阶段萃取的时候,用氯仿萃取3或5次,再用乙酸乙酯萃取,问题出现了。首先是在 ...

如果要分阶段萃取,那也应该是石油醚 乙酸乙酯 然后在氯仿 再正丁醇 乳化现象很难排除 因为加的有机相多了 自然彼此间可一定互溶 。还有萃取是不可能萃取完全的,因为萃取本身是一个两相平衡的过程,是按照比例分配的,只能无限接近,无法完全,一般等体积萃取三次,就认为ok了
Ecological Genomics;the scientific walking hormone
4楼2013-11-07 18:45:48
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刘洪存

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by czfscf at 2013-11-07 18:45:48
如果要分阶段萃取,那也应该是石油醚 乙酸乙酯 然后在氯仿 再正丁醇 乳化现象很难排除 因为加的有机相多了 自然彼此间可一定互溶 。还有萃取是不可能萃取完全的,因为萃取本身是一个两相平衡的过程,是按照比例分配 ...

分阶段萃取不应该按极性来吗?石油醚<氯仿<乙酸乙酯<正丁醇,没错吧?
5楼2013-11-08 09:59:19
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