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runying36

银虫 (正式写手)

引用回帖:
10楼: Originally posted by luyongchao at 2013-11-06 15:51:04
表达量太低,应该纯化不出来吧!...

如果实在是要纯化出蛋白,只要检测到有存在,还是可以想办法优化的,这只有自己试试看了
11楼2013-11-06 21:53:15
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runying36

银虫 (正式写手)

引用回帖:
10楼: Originally posted by luyongchao at 2013-11-06 15:51:04
表达量太低,应该纯化不出来吧!...

如果单因素的条件不能改变状况,可以试试用正交分析多因素的作用,祝好运
12楼2013-11-06 21:55:03
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luyongchao

新虫 (小有名气)

引用回帖:
12楼: Originally posted by runying36 at 2013-11-06 21:55:03
如果单因素的条件不能改变状况,可以试试用正交分析多因素的作用,祝好运...

xiexie
13楼2013-11-08 09:39:27
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gerileyy

禁虫 (小有名气)

本帖内容被屏蔽

14楼2013-11-18 10:02:35
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runying36

银虫 (正式写手)

引用回帖:
14楼: Originally posted by gerileyy at 2013-11-18 10:02:35
楼主 您好!您有酵母分泌表达检测的蛋白电泳图么、?...

我是直接用WB 检测的,因为有些量比较少SDS不容易判断
15楼2013-11-18 10:36:07
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省心小姐

新虫 (初入文坛)

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3楼: Originally posted by anyaxiong at 2013-11-04 21:50:49
酵母表达影响因素很多:比较重要的考虑甲醇的量,诱导温度,诱导时间,接种量和酸碱度等,还有就是你的蛋白可能表达了,只是检测方法不当也不无可能,有标签的蛋白建议做WB;还有酵母表达有糖基化修饰,会导致实际蛋 ...

具体甲醇的量应该加多少?过多会导致什么结果?
16楼2014-09-17 15:21:46
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runying36

银虫 (正式写手)

引用回帖:
16楼: Originally posted by 省心小姐 at 2014-09-17 15:21:46
具体甲醇的量应该加多少?过多会导致什么结果?...

甲醇量没优化过奥,就是0.5%
17楼2014-09-18 06:45:34
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劣势路单

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by runying36 at 2013-11-05 11:32:30
谢谢楼上各位的热心回应,我今天很高兴地告诉大家我已经优化出来了,其实就是改变了一下pH值从7.4降下来的几个看来都有效果。谢谢了!

你好楼主,请问PH从7.4降到多少的啊?是之前没表达,降了有表达了是吗?
18楼2015-10-26 15:30:39
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莫知

新虫 (初入文坛)

你好,我也在做毕赤酵母,在摇瓶发酵是,蛋白质表达,有酶活,但是上罐发酵不利用甲醇,不表达,求赐教
19楼2016-06-10 20:49:20
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