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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 外源蛋白在毕赤酵母中不表达
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runying36

银虫 (正式写手)
引用回帖:
10楼: Originally posted by luyongchao at 2013-11-06 15:51:04
表达量太低，应该纯化不出来吧!...

如果实在是要纯化出蛋白，只要检测到有存在，还是可以想办法优化的，这只有自己试试看了
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11楼2013-11-06 21:53:15
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runying36

银虫 (正式写手)
引用回帖:
10楼: Originally posted by luyongchao at 2013-11-06 15:51:04
表达量太低，应该纯化不出来吧!...

如果单因素的条件不能改变状况，可以试试用正交分析多因素的作用，祝好运
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12楼2013-11-06 21:55:03
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luyongchao

新虫 (小有名气)
引用回帖:
12楼: Originally posted by runying36 at 2013-11-06 21:55:03
如果单因素的条件不能改变状况，可以试试用正交分析多因素的作用，祝好运...

xiexie
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13楼2013-11-08 09:39:27
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gerileyy

禁虫 (小有名气)
本帖内容被屏蔽
14楼2013-11-18 10:02:35
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runying36

银虫 (正式写手)
引用回帖:
14楼: Originally posted by gerileyy at 2013-11-18 10:02:35
楼主 您好！您有酵母分泌表达检测的蛋白电泳图么、？...

我是直接用WB 检测的，因为有些量比较少SDS不容易判断
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15楼2013-11-18 10:36:07
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省心小姐

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by anyaxiong at 2013-11-04 21:50:49
酵母表达影响因素很多：比较重要的考虑甲醇的量，诱导温度，诱导时间，接种量和酸碱度等，还有就是你的蛋白可能表达了，只是检测方法不当也不无可能，有标签的蛋白建议做WB；还有酵母表达有糖基化修饰，会导致实际蛋 ...

具体甲醇的量应该加多少？过多会导致什么结果？
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16楼2014-09-17 15:21:46
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runying36

银虫 (正式写手)
引用回帖:
16楼: Originally posted by 省心小姐 at 2014-09-17 15:21:46
具体甲醇的量应该加多少？过多会导致什么结果？...

甲醇量没优化过奥，就是0.5%
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17楼2014-09-18 06:45:34
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劣势路单

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by runying36 at 2013-11-05 11:32:30
谢谢楼上各位的热心回应，我今天很高兴地告诉大家我已经优化出来了，其实就是改变了一下pH值从7.4降下来的几个看来都有效果。谢谢了！

你好楼主，请问PH从7.4降到多少的啊？是之前没表达，降了有表达了是吗？
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18楼2015-10-26 15:30:39
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莫知

新虫 (初入文坛)
你好，我也在做毕赤酵母，在摇瓶发酵是，蛋白质表达，有酶活，但是上罐发酵不利用甲醇，不表达，求赐教
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19楼2016-06-10 20:49:20
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