应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 外源蛋白在毕赤酵母中不表达
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
52/1返回列表
查看: 2562  |  回复: 18
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

runying36

银虫 (正式写手)

[求助] 外源蛋白在毕赤酵母中不表达

有哪位热心的战友给提示一下，我的外源蛋白在毕赤酵母中不表达，实验室同期做得都有表达，说明系统没有问题，但我的为什么没表达？有么有实战经验，一般这种情况先从哪方面试比较靠谱？
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2013-11-04 16:58:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

luyongchao

新虫 (小有名气)
引用回帖:
12楼: Originally posted by runying36 at 2013-11-06 21:55:03
如果单因素的条件不能改变状况，可以试试用正交分析多因素的作用，祝好运...

xiexie
回复此楼
13楼2013-11-08 09:39:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 19 个回答

xiaopeiliang

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
runying36: 金币+1, ★有帮助, 做了WB没检测到信号 2013-11-05 01:02:21
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-11-05 12:41:56
不表达还是表达量低，有没有做WB检测下；
如果是不表达：考虑目的基因有没有启动子；再就是考虑重组转化的问题了。
如果表达量低：可能是基因序列不适合毕赤酵母表达体系，可以考虑优化密码子；  或者体内体外构建多拷贝增加表达量，发酵条件的筛选也可以尝试
赞一下 回复此楼
2楼2013-11-04 21:48:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

anyaxiong

铁杆木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
runying36: 金币+1, ★有帮助, 做了WB没检测到信号，这样不知道优化这些方面会不会有实质性改变 2013-11-05 01:03:05
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-11-05 12:42:03
酵母表达影响因素很多：比较重要的考虑甲醇的量，诱导温度，诱导时间，接种量和酸碱度等，还有就是你的蛋白可能表达了，只是检测方法不当也不无可能，有标签的蛋白建议做WB；还有酵母表达有糖基化修饰，会导致实际蛋白大小比理论值要大一些。
赞一下 回复此楼
爱拼才会赢
3楼2013-11-04 21:50:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

anyaxiong

铁杆木虫 (知名作家)
引用回帖:
2楼: Originally posted by xiaopeiliang at 2013-11-04 21:48:47
不表达还是表达量低，有没有做WB检测下；
如果是不表达：考虑目的基因有没有启动子；再就是考虑重组转化的问题了。
如果表达量低：可能是基因序列不适合毕赤酵母表达体系，可以考虑优化密码子；  或者体内体外构建 ...

拷贝数的增加并不一定能增加蛋白表达量，只是理论上有可能而已。
赞一下 回复此楼
爱拼才会赢
4楼2013-11-04 21:52:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 19 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料调剂 +7 一样YWY 2026-04-02 7/350 2026-04-02 21:49 by dongzh2009
[考研] 280求调剂 +10 咕噜晓晓 2026-04-02 11/550 2026-04-02 21:31 by zllcz
[基金申请] esi高被引论文是不是能对中标有所加分和帮助呢 +4 redcom 2026-04-01 5/250 2026-04-02 20:48 by redcom
[考研] 319求调剂 +16 太容易1018 2026-04-01 16/800 2026-04-02 20:12 by seattle40
[考研] 求调剂 302分初试 0854 +5 伶可乐 2026-04-02 5/250 2026-04-02 17:53 by 笔落锦州
[考研] 学硕化学工程与技术，一志愿中国海洋大学320+求调剂 +8 披星河 2026-04-02 8/400 2026-04-02 14:12 by oooqiao
[考研] 266求调剂 +4 学员97LZgn 2026-04-02 4/200 2026-04-02 13:03 by yulian1987
[考研] 0805求调剂 +8 是水分 2026-03-31 8/400 2026-04-02 10:46 by guanxin1001
[考研] 07生物学求调剂 一志愿同济大学359分 +3 LAMC. 2026-03-30 3/150 2026-04-02 10:26 by 18828373951
[考研] 348环境工程调剂 +3 吴彦祖24k 2026-04-01 3/150 2026-04-02 09:14 by nanaliuyun
[考研] 303求调剂 +8 DLkz1314. 2026-03-30 8/400 2026-04-02 09:08 by sanrepian
[考研] 285求调剂 +5 FZAC123 2026-03-30 5/250 2026-04-01 15:50 by 韩雨涵
[考研] 求调剂 +4 图鉴212 2026-03-30 5/250 2026-04-01 15:32 by 图鉴212
[考研] 求调剂 +5 零八# 2026-03-27 5/250 2026-04-01 14:40 by yulian1987
[考研] 材料与化工调剂一志愿大连海事085600，349 +9 吃的不少 2026-03-30 9/450 2026-04-01 11:24 by wangjy2002
[考研] 土木304求调剂 +3 兔突突突， 2026-03-31 3/150 2026-04-01 09:42 by JourneyLucky
[考研] 266分，求材料冶金能源化工等调剂 +8 哇呼哼呼哼 2026-03-27 10/500 2026-03-31 13:35 by Huaxue_Wang
[考研] 11408总分309，一志愿东南大学求调剂，不挑专业 +5 天赋带到THU 2026-03-29 6/300 2026-03-30 20:49 by dick_runner
[考研] 331环境科学与工程求调剂 +3 熠然好运气 2026-03-27 3/150 2026-03-28 04:11 by fmesaito
[考研] 315调剂 +4 0860求调剂 2026-03-26 5/250 2026-03-27 11:23 by wangjy2002
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭