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a71840584

金虫 (正式写手)

[求助] 植物分子实验 已有1人参与

我想做植物分子方面的实验，不知道从哪方面下手，一点基础也没有，我出去开会看有人做拟南芥光合作用基因表达的研究， 就比如说拿这个当例子，我也想研究一下一种有毒物质对拟南芥光合作用的影响，已经测定其叶绿素含量在有毒物质的影响下是减少的，下面想做点分子的，研究基因表达的，该怎么做，提RNA吗，提哪里的，怎么提，提出来在干什么？或者测完一个酶的活性，再从分子水平研究下其基因的表达，又该怎么做？
我上面这些只是举的例子，因为我一点基础也没有，还请做植物分子研究的专家能详细给说说从哪做起，该怎么做，就拿拟南芥做例子吧，这好像是做分子的模式生物。
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再牛逼的肖邦也弹不出哥的忧伤。。。
1楼 2013-10-29 21:52:42
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annwt

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
xy656691: 金币+3, 感谢 2013-11-06 21:41:40
作个蛋白双向。最好双荧光
有毒处理与无毒处理对照
然后找蛋白，打几个质谱，再分析基因。
如果有时间再寻找信号通路，
^_^
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2楼2013-10-30 17:09:32
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starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
楼主没有导师么？感觉上做研究全靠自己折腾。从零基础开始做光合作用分子工作，很容易费很大劲做不出像样的数据来。楼主实验室没有什么相对比较成熟的研究基础么，从那些基础开始做不会比较好么？
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3楼2013-10-30 17:41:11
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文库构建

铁虫 (小有名气)
感谢参与，应助指数 +1
本帖内容被屏蔽
4楼2013-10-31 11:17:33
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a71840584

金虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by starseacow at 2013-10-30 17:41:11
楼主没有导师么？感觉上做研究全靠自己折腾。从零基础开始做光合作用分子工作，很容易费很大劲做不出像样的数据来。楼主实验室没有什么相对比较成熟的研究基础么，从那些基础开始做不会比较好么？

导师是做农药残留分析的，顺便做毒理，我们实验室做微生物和动物多，植物没人做过，好不容易会做些生理的了，现在又想做点分子的，无从下手啊，说做拟南芥光合作用的只是举个例子，我是参加会议见有人做这个
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5楼2013-11-06 15:48:35
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starseacow

专家顾问 (职业作家)
引用回帖:
5楼: Originally posted by a71840584 at 2013-11-06 15:48:35
导师是做农药残留分析的，顺便做毒理，我们实验室做微生物和动物多，植物没人做过，好不容易会做些生理的了，现在又想做点分子的，无从下手啊，说做拟南芥光合作用的只是举个例子，我是参加会议见有人做这个...

不知道你是出于读博还是读研的状态，如果计划开始新的博士研究，着手搭建一些植物分子与生理平台，找一个感兴趣的点做下去还可以，如果临近毕业没多长时间，最好还是不要浪费太多精力，就算想做，最好结合实验室已有的研究与实验基础，看看哪些可以移植到植物上做做
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6楼2013-11-06 17:27:51
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a71840584

金虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by starseacow at 2013-11-06 17:27:51
不知道你是出于读博还是读研的状态，如果计划开始新的博士研究，着手搭建一些植物分子与生理平台，找一个感兴趣的点做下去还可以，如果临近毕业没多长时间，最好还是不要浪费太多精力，就算想做，最好结合实验室已 ...

我刚读博一呀，我就做毒理的，就是研究一种新药对环境有没有毒，风险评价。然后指示生物是植物（比如小麦啦，蚕豆啦），指标很简单都，原来就是生理生化，简单的不行，什么发芽率，株高，活性氧，抗氧化酶，彗星实验，微核实验。通过这些指标来反应新药对植物有没有影响。现在想做些分子的，具体往哪个方向做也不知道，目前看文献想到的就是做对抗氧化酶如SOD、CAT基因表达影响程度如何，其实就说从原来的测酶活转到测定其基因表达量上了（用RT-PCR，最后得出来柱状图那种）
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再牛逼的肖邦也弹不出哥的忧伤。。。
7楼2014-04-19 20:03:52
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starseacow

专家顾问 (职业作家)
引用回帖:
7楼: Originally posted by a71840584 at 2014-04-19 20:03:52
我刚读博一呀，我就做毒理的，就是研究一种新药对环境有没有毒，风险评价。然后指示生物是植物（比如小麦啦，蚕豆啦），指标很简单都，原来就是生理生化，简单的不行，什么发芽率，株高，活性氧，抗氧化酶，彗星实 ...

多看看文章吧，如果想深入到分子水平研究新药的环境影响，测定指标不一定要专注在具体抗氧化酶的表达情况，还有很多指标和信息值得探讨
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8楼2014-04-19 21:07:30
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飘落Oo天气

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

你需要提取DNA，引物撰写，选择内参，普通PCR检测引物（找公司做可以忽略），RNA提取，cDNA反转录，RT-PCR，核酸凝胶电泳，如果要看表达后的蛋白数量的话还需要做个免疫印迹WB。
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9楼2014-04-22 03:35:21
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